凌峰 张勇 辛向阳

葡萄膜黑色素瘤(UM)是成人最常见的原发性眼内恶性肿瘤，恶性程度高、易转移、预后差[1-2]。UM患者尽管以手术为主的综合治疗局部控制良好，但复发、转移仍是术后面临的主要问题[3]，目前转移后治疗尚无一致意见，且效果差。针对癌基因设计靶向药物是治疗肿瘤的重要途径之一，因此，深入研究UM发生发展的分子机制、寻找新型肿瘤转移标志物及治疗靶点具有重要的科学意义和临床价值。

纺锤体动粒相关复合体-1(SKA1)是纺锤体和动粒相关复合物(SKA)的重要组成部分(或称亚基)，参与有丝分裂的调控。破坏SKA1的灵活性，或其微管蛋白结合位点，都能扰乱有丝分裂的正常进程，使有丝分裂阻滞于分裂中期，无法进入后期[4-5]。有文献报道，SKA1在胃癌、肝细胞癌、非小细胞肺癌等恶性肿瘤发生发展过程中发挥重要作用[6-7]，然而，SKA1在UM组织及细胞中的表达、作用及分子机制目前尚不清楚。本研究首次探讨了SKA1在UM发生发展过程中的作用，并通过基因表达谱芯片联合生物信息学分析探寻SKA1的分子机制。

1 材料与方法

1.1 细胞株和细胞培养A-375、MUM-2B和MUM-2C细胞株由天津医科大学眼科医院孙丰源教授惠赠。细胞培养使用含体积分数10%胎牛血清(FBS)的高糖DMEM培养液(美国Gibco公司)，并加入10 g·L-1青链霉素预防细菌污染，置于37 ℃、含体积分数5% CO2培养箱中，间隔2～3 d更换培养基。

1.2 筛选SKA1敲减的稳转细胞株重悬A-375、MUM-2B和MUM-2C细胞，细胞浓度均调整为4×104个·mL-1，各吸取2 mL细胞悬液，接种于6孔板，继续培养，细胞汇合度达30%～40%时，吸去培养液……