吉梦 刘明 马波 刘轩 裴澄 陈丽

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是各种细胞在视网膜前、后表面及玻璃体内增生蔓延形成纤维细胞膜，继而引起视网膜的收缩、牵拉，进一步导致牵拉性或复发性视网膜脱离(RD)的复杂眼科疾病[1]。其中视网膜色素上皮 (RPE)在玻璃体内生长因子和细胞因子的作用下，发生上皮间充质转化(EMT)和细胞外基质 (ECM )合成是PVR形成的关键环节[2-3]。由于PVR 的最终预后极差，对其早期防治是目前研究的主旨，而药物干预更是近年来研究的热点。药物防治PVR一直都受到广泛的关注，主要集中在抗炎、抗增殖、抑制EMT、拮抗细胞因子、信号通路抑制剂等，大多局限在基础研究阶段，且目前临床试验暂未发现有药物能够有效防治PVR。

转化生长因子-β2(TGF-β2)在PVR患者的视网膜前膜中异常高表达，并被标记为EMT的诱导因子，目前已作为RPE细胞纤维化模型的主要诱导因子[4]。我们课题组前期研究发现，骨形态发生蛋白(BMP)-6可以减轻氧化应激损伤[5]。氧化应激可以导致RPE细胞的损伤，也可以加剧TGF-β2所致的RPE细胞纤维化[6]。所以本研究拟在既往研究的基础上，运用siRNA干扰BMP-6的表达，构建BMP-6过表达质粒，进一步从正反两方面观察BMP-6对 RPE细胞迁移的影响，为PVR的防治提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器RPE细胞株(美国ATCC公司)，DMEM培养基/F12 、胎牛血清(FBS) (Gibco公司，美国)，BMP-6(NM_001718)克隆质粒(优宝生物，重庆)，TGF-β2 (PeproTech公司,美国)，兔多克隆抗体GAPDH(杭州贤至生物科技有限公司)，兔多克隆抗体BMP-6(Affinity公司,美国)，HRP标记的羊抗兔二抗(武汉博士德生物工程……