模拟子宫微环境诱导大鼠胎盘间充质干细胞向子宫内膜上皮细胞方向分化的实验研究*
2021-08-27李爱丽赵飞张彤艳马志玲肖雅琳
李爱丽,赵飞,张彤艳,马志玲,肖雅琳
(邯郸市中心医院1.东区妇四科,2.西区普外二科 河北 邯郸056001)
子宫内膜不仅具有高度的增殖活性,还具有周期性更新的特性,并受卵巢激素变化的调节[1]。子宫内膜的来源与循环的骨髓干细胞有关,也可能与内膜中残留的胚胎干细胞有关[2]。胎盘间充质干细胞(placental mesenchymal stem cells,PMSCs)属于一类多能干细胞,是从胎盘组织中分离培养出来的。PMSCs 具有易贴壁生长的特性,其生物学特性与骨髓间充质干细胞相似,具备高自我更新和多向分化的能力[3-4]。对哺乳类动物和人类来说子宫内膜是维持正常生殖能力的必要条件[5]。有研究表明[6],子宫内膜损伤可导致不孕,损伤的子宫内膜会出现大量的瘢痕化,导致子宫供血不足,影响胚胎着床。由于机体子宫功能和内环境的有序性和复杂性,因此目前无良好的治疗方法,随着干细胞技术的发展,临床开始使用干细胞诱导分化修复子宫内膜[7-8]。本研究模拟子宫微环境诱导大鼠PMSCs 向子宫内膜上皮细胞方向分化,以期为临床运用干细胞分化修复子宫内膜提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
实验动物:选择2月龄的SD 大鼠,体重150~180 g,由南京君科生物工程有限公司提供。实验试剂:DMEM 培养基(美国HyClone 公司),兔抗大鼠波形蛋白抗体、小鼠抗大鼠角蛋白抗体(美国Gibco 公司),兔抗大鼠细胞角蛋白7(CK-7)、细胞角蛋白18(CK-18)、细胞角蛋白19(CK-19)、上皮膜抗原(EMA)抗体(上海钰博生物科技有限公司),DMEM/F12 培养液(杭州吉诺生物医药技术有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 大鼠PMSCs 原代培养及传代将雌、雄大鼠按1∶3 合笼,于第2 天上午8:00 查看是否有阴栓形成,如有则确定为受孕,记为ES。……
