新生鼠缺氧缺血性脑损伤远期行为学研究
2021-08-27林爱金王洁琼敖丽娟陈茉弦
林爱金,王洁琼,敖丽娟,陈茉弦
昆明医科大学康复学院,云南昆明市 650500;
缺氧缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain damage,HIBD)由围产期缺血、缺氧引起,是导致新生儿脑损伤死亡或神经功能损害的最重要原因[1-2],带来严重的神经系统后遗症,如脑瘫、癫痫、孤独症和智力障碍等[3]。动物行为学评价已作为较为可靠的手段应用于HIBD 模型,但主要集中于早期,且结论不一。本研究探讨脑损伤模型小鼠远期行为的变化,主要涉及运动、情绪和学习记忆。
1 材料与方法
1.1 试验动物
SPF 级C57BL/6 小鼠50 只,10 日龄,雌雄不限,体质量3.85~4.50 g,购自昆明医科大学实验动物中心,动物实验许可证号SCXK(滇)K2015-0002。室温(23±2)℃饲养,光照12 h(7:00 a.m.~7:00 p.m.),自由饮食水。
1.2 试验器材
1.2.1 明暗穿梭箱
由塑料板围成40×40×35 cm 箱体,明箱底部和四壁均为白色,暗箱底部和四壁均为黑色,由一面40×35 cm的墙分隔,墙的底部中心有7×7 cm开口。
1.2.2 高架十字迷宫
由黑色木板围成两个开臂和两个闭臂,“十”字型摆放,臂底35×5 cm,闭臂墙高15 cm,开臂边缘由0.5×0.5 cm 的方块包围,距地面100 cm;中央平台为5×5cm正方形。
1.2.3 新事物试验箱
由透明塑料板围成50×50×50 cm 的正方形箱体,周围用黑布环绕。
1.2.4 Y迷宫实验
30×8×10 cm 迷宫臂3 个,相互间夹角120°。摄像机置于臂上方1.5 m,记录小鼠活动,Supermaze 分析软件(上海欣软信息科技有限公司)分析。
1.3 动物分组及造模
小鼠分为对照组(n=20)和HIBD 组(n=30)。HIBD 组异氟烷25 μl 吸入麻醉,固定于无菌动物手术台,颈部切口5~10 mm,分离左颈总动脉;5-0 丝线双重结扎左颈总动脉后离断,缝合伤口。手术操作控制在10 min内。
术后,小鼠置于带有母鼠气味的垫料上休息30 min,之后转移到母鼠旁休息1 h,再置于含8% O2和92%N2混合气体的34 ℃恒温缺氧箱中45 min。……
