王 琳， 张紫怡， 金 静， 段海潇， 王润杨， 胡 翰， 汪 洋， 刘滨磊

(湖北工业大学生物工程与食品学院， 湖北 武汉 430068)

图 1 BGC823细胞对不同浓度嘌呤霉素敏感性曲线

图 2 流式细胞仪检测BGC823-Fluc单克隆细胞纯度

图 3 BGC823细胞与FLuc-BGC823细胞生长对比

图 4 相对荧光值与细胞数目的相关性曲线

图 5 活体动物拍摄裸鼠腹腔植瘤

胃癌的形态学、分子特征复杂，具有高度异质性，为了鉴定病理和分子生化机制，已经在大鼠和小鼠中建立了各种实验动物模型[1]。生物发光是存在于生物体内的一种特殊类型的发光现象，主要指在酶的催化作用下将生物能转化成光能的过程，而不依赖于有机体对光的吸收[2]。生物发光成像技术具有非侵袭性、可定量、高灵敏度、操作简单，以及能够实时及连续动态监测等优点，被广泛应用于生物医学研究等领域[3]。

荧光素酶(luciferase)报告系统是生物发光最常见的系统之一，是luciferase 以荧光素(luciferin)、三磷酸腺苷(ATP)和O2为底物，在Mg2+存在时发生酶促反应产生光子的过程[4]。荧光素酶报告基因被广泛应用于构建特殊的单克隆细胞系，用于抗肿瘤药物的筛选。被荧光素酶标记的肿瘤细胞可通过腹腔植瘤到动物体内，可用生物发光成像仪进行检测。柯宗煌等人构建了稳定表达荧光素酶的B16R细胞系，并构建适用于小动物活体成像观察的C57 小鼠皮下移植瘤模型[5]。

绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)是重要的探针分子，广泛应用于标记特定分子或细胞[6]，其缺陷是不能像酶一样有信号放大作用[7]，表达量低时不易检测。……