miRNA-200b通过靶向RhoA抑制宫颈癌细胞增殖、促进细胞凋亡
2021-08-21何丽杰陈会佳王静常丹丹吕丹丹李海娜天津市第五中心医院检验科天津300450
何丽杰 陈会佳 王静 常丹丹 吕丹丹 李海娜(天津市第五中心医院检验科,天津300450)
宫颈癌是世界范围内常见癌症,是严重威胁妇女生命的常见恶性肿瘤之一,女性患者死亡率较高[1]。微小RNA(microRNA,miRNA)是内源性单链小RNA,可通过翻译后修饰在人类肿瘤发生发展中起重要作用。研究报道,miRNA与宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭等密切相关,是宫颈癌诊断、治疗和预后评估的新靶点[2-3]。miRNA-200是一类抑制肿瘤的miRNA家族,包括miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c等,促进miR-200家族表达可抑制胰腺癌细胞侵袭和迁移[4]。研究发现,miRNA-200b在上皮性卵巢癌中异常表达,且血浆miRNA-200b水平可作为早期诊断上皮性卵巢癌的分子标志物[5]。RhoA是具有GTP酶活性的小分子G蛋白,参与肿瘤细胞生长、血管生成及浸润转移等进程。研究发现,RhoA在胃癌组织及肺腺癌组织中均存在过度表达,参与肿瘤浸润转移、侵袭[6-7]。Bax为Bcl-2家族成员,具有促凋亡作用,过表达Bax可促进多种细胞自发凋亡,还可增加由多种因素引起的细胞凋亡[8]。CyclinD1在多种恶性肿瘤中异常高表达,可促进肿瘤细胞增殖[9]。目前关于miRNA-200b及RhoA蛋白对宫颈癌细胞增殖凋亡的影响鲜有报道。因此,本研究验证miRNA-200b与RhoA蛋白在宫颈癌细胞中的靶向关系,并探讨其在宫颈癌细胞增殖、凋亡中的作用,为宫颈癌治疗提供新靶点。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试剂人宫颈癌HeLa细胞购自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库;胎牛血清购自美国Gibco公司;Lipofectamine2000购自美国Invitrogen公司;RIPA裂解液、BCA蛋白定量试剂盒、ECL化学发光液、CCK8试剂盒均购自碧云天生物有限公司;兔抗……
