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VEGF调控肥胖小鼠棕色脂肪组织炎症反应相关基因表达及通路的研究①

2021-08-21李思琦芦小单王国庆高鸿霞北华大学医学技术学院吉林132013

中国免疫学杂志 2021年13期
关键词:小鼠差异信号

李思琦 芦小单 王国庆 高鸿霞(北华大学医学技术学院,吉林132013)

肥胖是一种低级别的慢性炎症性疾病,与2型糖尿病和胰岛素抵抗等代谢紊乱相关[1]。目前对肥胖的研究多集中在脂肪组织,而脂肪组织又分为白色脂肪组织(white adipose tissue,WAT)和棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)。白色脂肪细胞的主要作用是储存能量,而棕色脂肪细胞参与调节能量消耗和快速产热。近年研究发现,BAT通过减少脂肪炎症,能够抵抗高脂肪饮食(high fat diet,HFD)诱导的肥胖并维持全身葡萄糖稳态[2]。血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA/VEGF)参与调控脂肪组织能量代谢,抑制VEGF表 达 的小鼠,能 够抵抗HFD诱导的肥 胖[3]。但VEGF调控BAT能量代谢的机制有待进一步研究。

RNA-Seq是近年发展起来的一种基于序列分析的检测整体转录组表达的方法。同早期的技术方法相比,如微列阵,RNA-Seq具有更广泛的动态范围和更高的检测低丰度转录本的灵敏度,允许检测更多的差异表达基因和更高的折叠变化[4]。本研究利用VEGF可逆抑制转基因小鼠,通过RNA-Seq建立了BAT转录组图谱,并筛选出VEGF正常表达组BAT和VEGF抑制表达组BAT中差异表达的基因,对其进行功能注释(GO)和信号通路(KEGG)富集分析,以探究VEGF调控BAT炎症反应的可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物文献[3]报道过四环素调节VEGF可逆抑制小鼠模型,小鼠饲养于东北师范大学转基因动物实验中心。温度(22±2)℃,湿度40%~70%,12 h/12 h光暗循环,可自由获取食物和水。所有程序均获得东北师范大学动物护理与使用委员会批准。将小鼠分为VEGF正常表达组(dox+组)和VEGF抑制表达组(dox-组),每组6~10只,所有小鼠选用基因型:VEGFtetO/tetO:bAKtg,小鼠出生后喂食普通饲料4周后换成高脂饲料喂养,持续8周。……

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