李少华，张铁山，邢克炎，何新庄，李玉伟

1.永煤集团总医院骨科，商丘 476600

2.漯河市中心医院骨科，漯河 462000

骨质疏松症是一种以骨量减少、骨微结构退化和骨脆性增加为特点的骨代谢疾病［1-2］。正常的骨代谢是一种由成骨细胞产生新骨组织和破骨细胞吸收旧骨组织构成的动态平衡［3］。成骨细胞的分化涉及多种转录因子，如Runt相关转录因子2（Runx2）、成骨相关转录因子（Osx）、骨钙素（Ocn）和转录激活因子4（ATF4）等。有研究［4］显示，ATF4基因敲除小鼠失去形成成熟骨架的能力。在成骨细胞中，ATF4通过与ATF3结合，促进下游C/EBP 同源蛋白（CHOP）的表达，从而影响骨形成［5］。CHOP是骨骼发育的必需因子，有研究［6］发现其可与骨形态发生蛋白（BMP）相互作用，但CHOP的过表达会使骨组织受损。

内质网应激（ERS）是细胞内的一种重要防御机制［7］，主要通过未折叠蛋白反应（UPR）发挥作用，而UPR主要的经典通路包括双链RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶（PERK）/ATF6/肌醇需求酶1（IRE1）［8］。在骨代谢过程中，内质网对细胞内稳态的维持至关重要［9-10］。既往研究［11-13］证明，ERS与骨质疏松症密切相关，但ERS过度导致骨质疏松的分子机制仍不清楚。本研究通过ERS通路激动剂衣霉素（TM）模型和ATF4过表达模型，研究ATF4在ERS导致骨质疏松中的调控作用，为临床防止ERS过度导致骨质疏松提供依据。

1 材料与方法

1.1 动物和试剂

雌雄2对ATF4过表达杂合子C57BL/6J小鼠由美国Jackson实验室提供（货号：013072）。小鼠进行扩增繁殖后，通过鼠尾裂解法在新生小鼠中筛选出ATF过表达纯合子小鼠和野生型小鼠，待小鼠生长至12周龄即可进行下一步实验。……