石晓玲 贾 伟

(湖北省黄石市中心医院普爱院区麻醉科，黄石 435001)

炎性疼痛是一种慢性病理性疼痛，可能通过外伤、手术、肿瘤等引起局部组织炎症损伤，造成病理性疼痛[1]。细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein，ERK)，包括ERK1和ERK2，统称为ERK1/2，是MAPKs家族主要成员之一，参与细胞编码相关基因和细胞信号转导，在神经系统中的激活与各种疼痛的诱发以及维持都密切相关[2-3]。有研究发现，甲醛注射后脊髓组织神经元中ERK1/2磷酸化水平升高，减少ERK1/2磷酸化水平可对甲醛诱导的炎症性疼痛起一定的抑制作用[4]。氢吗啡酮(hydromorphine，HM)是一种半合成的阿片受体激动药，具有起效快、镇痛作用强、不良反应少等特点[5]。本研究探讨炎性痛大鼠脊髓ERK1/2信号通路的变化及HM的镇痛作用。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1实验动物：SPF级雄性大鼠30只，8～12周龄，体质量180～240 g，购自斯贝福(北京)实验动物科技有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK(京)2016-0002。

1.1.2主要试剂：HM(宜昌人福药业有限责任公司)；von Frey纤维毛(IITC)；弗氏完全佐剂(CFA)(Sigma)；DAB显色试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)；TRIzol(Invitrogen)；ERK1/2、GAPDH普通PCR上下游引物[生工生物工程(上海)股份有限公司]；抗ERK1/2、p-ERK1/2抗体、山羊抗兔二抗(LI-COR)；TNF-α、IL-6和IL-10 ELISA试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2 建立动物模型及分组

将SPF级雄性大鼠30只，随机分为3组，正常组、模型组和HM组。取20只大鼠，将大鼠麻醉后固定，于右侧足底皮下注射CFA(0.1 mL/只)，建立炎性痛大鼠模型。正常组将大鼠麻醉后，于右侧足底皮下注射等量生理盐水。模型组大鼠注射足出现缩足、红肿、舔爪等自发痛行为表示建模成功。模型建立后随机分为两组，HM组：在造模1 d后，腹腔注射0.3 μmol/L HM；……