S-烯丙基-L-半胱氨酸减弱LPS诱导的肺纤维化
2021-08-16熊越张晖周艳君
熊越,张晖,周艳君
(江南大学无锡医学院,江苏 无锡 214122)
0 引言
特发性肺纤维化(IPF)是一种以刺激性干咳和进行性呼吸困难为突出表现的慢性疾病,患者生存期较短,预后差,由于其发病机制不清,治疗方法十分有限[1]。2014年研制出了针对IPF治疗的两种新药,即吡非尼酮和尼达尼布[2],但鉴于其不良反应及费用,一般推荐轻、中度患者使用,且治疗效果有限,所以探讨其他候选改善肺纤维化的药物意义重大。
S-烯丙基-L-半胱氨酸(SAC)是一种从大蒜中提取的单体化合物,已有研究表明SAC具有抗氧化、抗肿瘤、抗细胞凋亡的活性[3],并且可降低海马中乙酰胆碱酯酶的活性,下调NF-κB、白细胞介素-1β等的表达,从而减轻神经系统炎症[4],但是否具有抗纤维化活性还未明确,本文旨在研究SAC对LPS诱导的小鼠肺纤维化及炎症的影响,从而为IPF的治疗提供新策略。
1 材料和方法
1.1 试剂
S-烯丙基-L-半胱氨酸(CHNOS,CAS 21593-77-1,纯度>99%)购自Target Molecule公司(中国上海),脂多糖购自sigma。
1.2 实验动物
C57BL/6小鼠购自南京模型动物研究中心,在江南大学实验动物中心SPF级别条件下饲养,小鼠实验过程得到了江南大学动物伦理委员会的批准。
1.3 LPS诱导肺纤维化
小鼠随机分为三组,分别为对照组、LPS组、LPS+SAC组(5mg/kg),将LPS溶于生理盐水中,SAC溶于水、乙醇和聚氧乙烯氢化蓖麻油的比例为8:1:1的溶剂中,小鼠麻醉后气管注射生理盐水或者LPS(5mg/kg),24h后腹腔内注射SAC(5mg/kg),于LPS给药后第7收集肺泡灌洗液及肺组织标本,以便进行后续的灌洗液细胞计数、蛋白浓度测定及定量RT-PCR等。
1.4 苏木素-伊红(HE)染色
用4%多聚甲醛固定LPS或生理盐水气管给药后第21天收集的肺组织,再经过脱水、浸蜡、包埋、切片(4mm),贴片、脱蜡后,进行HE染色,染色完成后封片,于显微镜下观察,评估肺损伤程度。……p>
