王泉 马瑞瑛 杨婷 张亚丽 许苗 撒玉玲 陈清波

结核分枝杆菌复合群(Mycobacteriumtuberculosiscomplex，MTBC)与非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria，NTM)临床上引起的疾病难以区别，在无菌种鉴定情况下NTM病经常被误诊为结核病，而两者治疗方案明显不同[1-2]。因此，快速准确地鉴定MTBC与NTM对结核病的早期诊断、早期治疗，以及对疾病防控均具有重要意义。传统的区分MTBC与NTM方法主要依靠培养法结合对硝基苯甲酸(PNB)和噻吩-2-羧酸肼(TCH)生长试验，但培养法耗时较长。恒温微流控芯片检测系统集等温扩增与产物检测一体化，具有操作简单、耗时短等优势；且其多样本和多重检测等功能可极大简化操作流程，降低了对实验人员要求，适于基层地区开展[3-4]。笔者利用恒温微流控芯片技术检测痰液标本中MTBC与NTM，并与分枝杆菌传统培养法和PNB/TCH生长试验进行对比，以评价其应用价值。

材料和方法

一、菌株来源

采用前瞻性研究方法，收集新疆医科大学第八附属医院2018年9月至2019年12月间经抗酸染色镜检阳性的痰液标本，共624份。

二、仪器和试剂

1.仪器：恒温扩增微流控芯片核酸分析仪、MTB-NTM微流控芯片由广州迪澳生物科技有限公司提供，设备可进行4块芯片反应，每块芯片可同时进行4份样本的MTB与NTM区分鉴定。

2.试剂：萋-尼染色液、酸性改良罗氏培养基(珠海贝索生物技术有限公司)；DNA提取液(广州迪澳生物科技有限公司)。

三、实验方法

1.罗氏固体培养和PNB/TCH生长试验菌种鉴定：将收集合格的3 ml痰液标本中加入2倍体积4%的氢氧化钠溶液后涡旋振荡混匀，静置15 min。……