1种布鲁菌抗体检测试纸条快速检测方法的建立
2021-08-10吴志强刘少蓉白民俊段晓珮黄素文段跃强
吴志强,刘少蓉,白民俊,段晓珮,高 强,黄素文,段跃强*
(1.内蒙古华希生物科技有限公司,内蒙古 呼和浩特 010111;2.北京美联泰科生物技术有限公司,北京 100176)
布鲁菌的主要传统检测技术分别有培养特性的鉴定、生化检验、病原分离鉴定及血清学检测等[1]。近年来,运用于临床检测布鲁菌病的免疫学方法主要有虎红平板凝集试验(RBPT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、补体结合试验(CFT)和试管凝集试验(SAT)等[2]。SAT和RBPT操作方法简单,是我国检测布鲁菌病最通用的方法[3],但缺点是容易发生交叉凝集反应,导致出现假阳性结果[4]。补体结合试验参与试验的因素多,操作比较复杂,试验耗时较长。ELISA虽然诊断率高,但存在交叉反应、试验干扰因素较多、重复性不好、对试剂成分及其生产品牌的选择性高、难以同时区分多种病菌等缺点[1]。
光滑型布鲁菌脂多糖(smooth lipopolysaccharide,sLPS)抗原能诱导动物机体产生长时间的抗体水平,因此,sLPS抗原是布病抗体检测的优势抗原。目前,市售布鲁菌检测试纸条将布鲁菌可溶性蛋白多糖复合物抗原作为检测线,但是存在的问题是产品灵敏度稍差,漏检概率较大。我们研制的布鲁菌抗体检测试纸条,采用了高度纯化的sLPS抗原作为检测抗原,同时利用间接法将胶体金标记在能与哺乳动物IgG普遍反应的葡萄球菌蛋白A(slaphylococcal protein A,SPA)上[5],充分发挥了胶体金试纸条敏感性高、可对不同动物进行布鲁菌病检测的特点和优势。
本试剂采用胶体金免疫层析法(GICA)研制了可检测牛、羊光滑型布鲁菌抗体的试纸条[6],作为当前兽医临床诊断动疫病最简便、快速、敏感特异的免疫学检测技术之一,可广泛应用于兽医临床快速检测和现场诊断[7],有巨大的发展潜力和广阔的应用前景。……
