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鹦鹉源禽博尔纳病毒的鉴定及全基因序列分析

2021-08-10翟俊琼李婉萍罗满林

中国兽医学报 2021年7期
关键词:检测

翟俊琼,单 芬,李婉萍,周 妞,罗满林,陈 武*

(1.广州动物园 广州市野生动物研究中心,广东 广州 510070;2.华南农业大学 兽医学院,广东 广州 510642)

禽博尔纳病毒(avian Borna virus,ABV)是单股、不分节段的负链RNA病毒[1],基因组全长8.9 kb,病毒粒子呈球形,直径约90 nm[2],基因组编码6种蛋白:核蛋白(N)、磷蛋白(P)、与磷蛋白重叠的小蛋白(X)、基质蛋白(M)、包膜蛋白(G)和RNA依赖的RNA聚合酶(L)[3]。2008年,ABV首次被鉴定为引起一种致命的鹦鹉神经疾病-腺胃性扩张症(proventricular dilatanon disease,PDD)的病原体[4-5];随后,在水禽和鸣禽中也发现该病毒[6-10]。到目前为止,已经从超过80种鸟类、50种鹦鹉上检测到8种不同基因型ABV[11-15]。ABV主要引起患病鸟类出现腹部肿大、体质量减轻、消化不良、共济失调等症状,病死率很高,导致大量圈养鸟类包括濒危物种的死亡,对养殖业以及供观赏类的服务业造成极大威胁[16-17]。目前,还没有有效的方法来治疗ABV感染,只能进行对症治疗和管理[12,18]。

国内对鹦鹉源禽博尔纳病毒(parrot Bornavirus,PaBV)的相关报道甚少[19],本试验通过观察疑似感染ABV的鹦鹉生前体征、死后剖检、病理切片以及RT-PCR检测PaBV核酸,最终证实鹦鹉感染PaBV;选取1份阳性样本扩增全基因组序列,通过分析其遗传进化关系和核苷酸同源性,了解该毒株的亲缘关系及流行趋势,为我国PaBV的防控提供一定的理论基础和参考。

1 材料与方法

1.1 病料收集于上海、成都、广州、佛山等养殖场的死亡鹦鹉,其中太阳锥尾鹦鹉4只、琉璃金刚鹦鹉1只、蓝眼巴丹鹦鹉2只、黄头亚马逊鹦鹉1只、红绿金刚鹦鹉1只和灰鹦鹉1只。

1.2 主要试剂病毒RNA抽提试剂盒购自AXYGEN,反转录试剂盒、pMD19-T载体、E.coliDH5α感受态细胞购自TaKaRa,胶回收试剂盒购自OMEGA,PCR反应酶购自Thermo Fisher。……

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