方明霞 董艺超 成子安 范雨萱 陈昱圻 高建恩 郭昌龙 马 旭*

1.北京协和医学院研究生院(100730)；2.国家卫生健康委科学技术研究所

间充质干细胞(MSC)具有组织修复和免疫调控的作用：在炎症环境中能够有效的抑制T、B淋巴细胞的增殖，增加Treg细胞的含量；在体内或体外特定的诱导条件下，能够分化成骨、软骨、脂肪等多种细胞，目前被广泛的应用于组织损伤修复、自身免疫性疾病的治疗[1]。P38 MAPK信号通路是细胞内信息传递的主要信号通路之一，可调节细胞生长、分化、炎症、压力刺激、凋亡等多种病理生理过程，是促炎性细胞因子合成的关键调节途径[2]。本研究利用P38 MAPK通路抑制剂SB202190抑制脐带间充质干细胞(UC-MSC)的P38 MAPK通路，观察该通路抑制对UC-MSC形态、表型以及分化能力的影响，进一步评价P38 MAPK通路抑制的UC-MSC促进糖尿病大鼠背部皮损修复的能力。

1 材料和方法

1.1 材料

第3代脐带间充质干细胞购自中盛溯源公司；SPF级7周龄ZDF雌性大鼠购自北京维通利华公司；DMEM-F12培养液、胎牛血清、双抗、PBS、0.25% Trypsin购自美国Gibco公司，人脐带间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒购自Cyagen公司，小分子化合物SB202190购自MCE公司，流式检测所用抗体CD14、CD19、CD31、CD73、CD105、CD44、CD90、CD34、CD45、CD146、HLA-DR购自Biolegend公司；6孔细胞培养板购自康宁公司，血糖仪、血糖试纸(1835960)购自稳捷公司；离心机购自湘仪公司，流式细胞仪采用BD Biosciences FACS Calibur。

1.2 细胞实验

1.2.1UC-MSC的复苏培养与鉴定取第3代UC-MSC复苏后，接种于含10%FBS+1%Anti-anti+DMEM /F12的培养瓶中于37℃、5%CO2恒温培养箱中培养。

1.2.2UC-MSC的小分子化合物处理UC-MSC在完全培养基中培养至第5代，0.25% Trypsin消化后接种于完全培养基，培养至融合度达……