周成慧,赵阳,王德行,席茂盛,罗学刚*

1(天津科技大学 生物工程学院 工业发酵微生物教育部重点实验室暨天津市工业微生物重点实验室,天津,300457)2(天津市微生物代谢与发酵过程控制技术工程中心,天津,300457)

乳酸菌是目前最为公认的一大类益生菌,其食用安全,并可对人体发挥多种健康功能,在食品、医药、畜牧业等领域有着广阔的应用前景[1-2]。温度在乳酸菌的制备、储存、应用中有重要的影响。乳酸菌作为最理想的功能蛋白质多肽类药物的口服投递载体,在对外源基因进行重组表达时,低温诱导往往能有助于降低包涵体形成、减少重组蛋白的降解,提高重组蛋白的生物活性[3-5],且能够降低能耗、减少工业生产成本。

β-羟脂酰-ACP脱水酶(fabz)是Ⅱ型脂肪酸合成途径中的重要酶,它主要负责催化β-羟脂酰-ACP脱水生成反-2-烯酰-ACP,其编码基因是fabZ。如果fabZ被抑制,细菌的生长和繁殖过程中的重要生物合成途径将会受到阻断,细菌无法生长[6]。目前基于fabZ基因的研究大多在于其具体结构与功能[7-9],尚未有文献报道温度与其转录调控间的关系。本研究在分析植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)CGMCC8198在不同温度处理后的转录组测序结果时发现,fabZ基因在温度降低时表达量明显上调。为明确这一低温诱导特性,本研究首先使用生物信息学方法对基因的启动子区域进行了分析预测[10-13],再以绿色荧光蛋白为报告基因构建启动子报告分析质粒,验证了fabZ基因启动子的转录活性及其受温度影响的情况,以期为深入探究乳酸菌冷激应答与fabZ基因功能机理及构建乳酸菌低温诱导表达载体奠定一定的基础。……