陶爱群，姜小文

（湖南环境生物职业技术学院，湖南 衡阳 421005）

湖南地处亚热带南部，气候温暖湿润，适于柑橘的生长，是中国柑橘重要产地之一。柚（Citrus maxima）是芸香科柑橘属植物，其果实营养丰富，富含维生素C，耐储藏，有“天然罐头”的美誉。但湖南1 月骤然的降温、极端低温或周期性大冻害的袭击，常导致柚园发生冻害，影响柚树生长，继而影响柚果产量和品质。已有的柚类低温胁迫研究[1-3]结果表明，柚类越冬期耐寒性存在差异且受外源PP333 调控。为了解柚的抗寒性差异，笔者选取湖南广泛栽培的沙田柚、琯溪蜜柚与新品系泉口冰雪柚为试材，研究低温胁迫后相关生理指标的变化，以期为柚类抗寒育种提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料选衡阳县泉口村常规管理水平的柚园5年生沙田柚、琯溪蜜柚和泉口冰雪柚3 个品种，砧木均为酸柚。

1.2 试验方法

2018 年12 月下旬—2019 年2 月下旬，每月1 次从正常结果、树冠外围无病虫害的树体采取健康生长、长势基本一致的春梢上第三或第四片叶。将叶片带至实验室后，用直径为1 cm 的打孔器打出叶圆片，分别置于1、-1、-3、-5、-7、-9 和-11℃可调温冰箱中（温度波动±0.5℃）处理12 h 后取出备用,以不经低温处理的材料作对照。

用DDS-312 型精密电导仪测定电导率，参照章文才[4]的方法计算出相对电导率；MDA 含量、SOD活性的测定用氮蓝四唑（NBT）法；CAT、POD 活性测定参照李玲等[5]的方法。每个指标测定5 次，取平均值。

1.3 数据统计分析

采用Excel 2010 进行数据分析和作图。

1.3.1 细胞伤害率计算细胞伤害率按相对电导率计算即：细胞伤害率（%）=（R-CK）/（R0-CK）×100%，其中R为低温处理材料的电导率，R0为低温处理材料经煮沸后的电导率，CK 为对照的电导率。……