陈 帆 高 扬 边文玲 李玉洁

新乡医学院第三附属医院(453003)

近年来，随着分子生物学和病理生理学的不断发展，人们发现子宫内膜异位症(EMs)的发病过程与活性氧(ROS)和抗氧化物质的失衡密切相关[1]。Nrf2/Keap1/HO-1信号通路在维持机体氧化平衡中发挥着至关重要的作用。核因子E2相关因子2(Nrf2)属于亮氨酸(CNC)调节蛋白家族成员之一，是机体调节抗氧化应激反应的重要的转录因子，Kelch样ECH相关蛋白(Keap1)是Nrf2的特异性受体。正常生理状态下，Nrf2与Keap1偶联形成聚合物，Nrf2处于相对失活状态；在氧化应激等状态下时，Keap1的构象发生改变，Nrf2从二聚体上解离并转移至细胞核，启动抗氧化反应元件，调控下游抗氧化基因如血红素氧合酶-1( HO -1)等的表达，清除多余的氧自由基，从而发挥抗应激作用[2-3]。萝卜硫素(SFN)是从十字花科植物中提取得到的一类异硫氰酸盐，具有抗炎、抗氧化等生物学作用[4]。近年研究发现SFN可激活Nrf2信号通路，上调HO-1等抗氧化蛋白的表达[5-6]。基于此，本实验通过运用SFN治疗EMs大鼠，从Nrf2/Keap1/HO-1信号通路蛋白表达的方面探讨其治疗EMs的作用机制，为其临床应用提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 实验动物

SPF级雌性健康未孕SD大鼠，鼠龄8～12周，体质量200～250g，购于安徽医科大学实验动物中心。实验开始前适应性饲养1周。光照与黑暗每12 h交替进行，室内温度保持在(24±2)℃，相对湿度65%。

1.2 试剂与仪器

SFN(含量≥99%)购自上海源叶生物有限公司；孕三烯酮胶囊购自华润紫竹药业有限公司；兔抗大鼠Nrf2、Keap1、HO-1及β-actin单克隆抗体、二抗山羊抗兔IgG均购自美国Sigma公司；实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)试剂盒购自德国Roche公司；……