于 帅 宋风丽 刘红巧 高万里

北京市大兴区人民医院 (102600)

宫颈癌为女性生殖系统恶性肿瘤[1]。人乳头瘤病毒(HPV)目前已发现100多种类型，其中40余种与生殖道疾病关系密切。有研究表明，90%以上宫颈鳞癌中可检测出HPV高危型别，持续感染HPV为导致宫颈癌的重要因素[2]。注射宫颈癌疫苗预防宫颈癌作用显著，明确地区间HPV基因型分布及混合感染的基因型对治疗及预防宫颈癌意义重大[3]。本研究检测大兴地区女性体检13200例宫颈上皮细胞中HPV基因分型，分析辖区内女性宫颈HPV感染状况及亚型分布情况，为预防提供参考。

1 资料与方法

1.1 资料

选取2017年5月—2019年12月在本院体检的来自大兴地区女性作为研究对象。纳入标准：①无锥切手术史、宫颈环切史；②初次行HPV检测，无HPV感染史；③知情本研究内容并签署同意书。排除标准：①合并其他宫颈疾病者；②对本研究依从性差；③合并其他感染性疾病。本研究经本院伦理委员会审批。

1.2 试剂与仪器

高危型HPV分型核酸检测试剂盒购自上海之江生物科技股份有限公司，全自动医用PCR分析系统(SLAN-96P，上海宏石医疗科技有限公司)，全自动核酸检测处理系统Autrax193购自上海之江生物医药科技有限公司，生物安全柜(HFsafe1200Class)购自上海力申科学仪器有限公司。

1.3HPV检测

常规采集标本[4]。提取DNA模板：取适量组织在液氮中研磨，并在其中加入细胞裂解液进行裂解，再加入RNass及蛋白酶K进行消化，再一次用苯酚、氯仿、异丙醇等抽提，清洗沉淀用乙醇，在以TE回溶。引物设计：扩增反应选择HPV晚期编码……