叶 茂，邓毛程，林凯旋，何雪莹，尹爱国

（1.广东轻工职业技术学院 食品与生物技术学院，广东 广州 510300；2.广东省特色调味品工程技术开发中心，广东 广州 510300；3.广东石油化工学院 生物与食品工程学院，广东 茂名 525000）

羧肽酶（carboxypeptidases，CPs）是指能专一催化水解多肽链羧基末端氨基酸的一类外肽酶，是一种具有重要应用潜力的工业酶制剂。羧肽酶的应用主要涉及到生物、化学、医学等多个学科领域。在食品和饲料工业，可用于制备高F值寡肽[3]，去除赭曲霉素[4]，多肽脱苦、生物活性多肽的延长或特异性修饰[5]；在生物学领域，可用于多肽的合成[6]及多肽氨基酸序列测定[7]；在医学用途方面，通过体内羧肽酶的检测达到诊断和治疗疾病的目的[8-9]。近几年，羧肽酶的新功能和新用途不断被发现和拓展，使得羧肽酶具有更高的研究价值和更广阔的应用前景。

目前，羧肽酶酶制剂商品供应主要来源于猪胰腺，但价格昂贵[10-11]。因此，利用微生物获得大量的羧肽酶，具有重要的现实意义[12-13]。黑曲霉（Aspergillus niger）是国际上公认的安全发酵微生物，且适合采用固态发酵的方式[14]，而黑曲霉生产羧肽酶发酵工艺条件鲜见报道[15]。本研究是在前期筛选分离纯化获得的羧肽酶活力较高的黑曲霉（Aspergillus niger）H1-6的基础上，利用固态发酵技术，优化其产酶发酵工艺参数，并考察发酵粗酶液在酱油酿造发酵中的应用效果，为实现羧肽酶的规模化生产、降低成本来满足商业化的需要，对推动我国相关产业发展具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.1.1 菌株