薛贻敏， 孟 春， 曾丽娟， 黄廷烽， 吴 畏， 林风辉△

（1福建医科大学省立临床医学院，福建省立医院重症医学四科，福建福州350001；2福州大学生物科学与工程学院，福建福州350108）

动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是心脑血管疾病的首要原因，后期斑块区域破裂形成的血栓可导致急性供血障碍甚至死亡。血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）源性泡沫细胞大量存在于AS 斑块病变区域内，是主要的泡沫细胞之一，它们通过自分泌细胞因子并促进自身的增殖、迁移和炎症反应，在AS 斑块重塑及失稳过程中发挥重要作用［1-2］。脂联素（adiponectin，APN）是脂肪细胞分泌的一种内源性蛋白质，具有调节脂质代谢、降低炎症反应、减轻胰岛素抵抗、稳定血管斑块等多种生物学效应，在AS 相关的多种心血管疾病中起保护作用［3］，但其具体作用机制仍未被完全阐明。本研究用甲基环糊精包被的胆固醇（cholesterol：methyl-βcyclodextrin，Chol：MβCD）诱导体外培养的 VSMCs源性泡沫细胞，并基于沉默信息调节因子1（silent information regulator 1，SIRT1）/过氧化物酶增殖物激活受体γ 辅激活因子1α（peroxisomal proliferator-activated receptor γ coactivator-1α，PGC-1α）通路探讨APN 对 VSMCs 泡沫化的影响，寻找 APN 抗 AS 的潜在机制。

材料和方法

1 主要试剂

人主动脉平滑肌细胞株（CRL-1999）购自ATCC。人重组 APN、Chol：MβCD 及油红 O 染料均购自 Sigma；胆固醇检测试剂盒及荧光标记胆固醇外流分析试剂盒均购自BioVision；胎牛血清购自Gibco。硫酸链霉素和青霉素均购自华北制药股份公司；DMEM低糖培养液及TRIzol 试剂购自Invitrogen；BCA 蛋白浓度测验盒购自上海碧云天生物工程有限公司；逆转录酶试剂盒购自TaKaRa；RT-qPCR 试剂盒购自Roche；PCR 引物由上海生工生物技术有限公司设计合成；兔抗 SIRT1、PGC-1α 和 GAPDH 抗体及辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）标记的山羊抗兔IgG均购自Cell Signaling Technology。……