槐果碱对肺癌A549细胞增殖凋亡的作用机制
2021-08-04符丹丹段丽娜柏玉举刘凤娇
安徽医科大学学报 2021年7期
符丹丹,段丽娜,柏玉举,刘凤娇
肺癌是全球范围内发病率和病死率最高的一种恶性肿瘤,据报道全球每年约有160万人死于肺癌,占所有癌症死亡人数的20%,严重威胁人类的生命健康。槐果碱(sophocarpine)即13,14-脱二氢苦参碱,是分离自苦参中的一种苦参类生物碱,槐果碱作为一类广谱抗肿瘤药物已被发现在胃癌、肝癌、多种妇科肿瘤、直肠癌等多种肿瘤中发挥抗肿瘤作用。然而槐果碱在肺癌中发挥抗肿瘤作用的报道较少,且其作用机制尚未被完全揭示。因此,该研究选取肺癌细胞A549细胞,应用槐果碱作用细胞后分析细胞增殖、凋亡以及相关蛋白表达情况的改变,并探究其可能的作用机制,以期为研发新的抗肺癌药物提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 主要试剂
A549细胞购自南京科佰细胞库;槐果碱购自南京普怡生物科技有限公司,批号190221,纯度98%;RPIM-1640培养基、10%胎牛血清(FBS)、双抗、胰酶均购自美国Gibco公司;MTT试剂盒购自天津奥淇洛谱生物科技有限公司;细胞培养耗材购自美国Corning公司;DMSO、Triton X-100、鼠源BrdU单抗、Annexin V-FITC试剂盒均购自美国Sigma公司;基质胶购自美国BD公司;TUNEL检测细胞凋亡试剂盒购自上海远慕生物科技有限公司;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)购自上海翊圣生物科技有限公司;RIPA裂解液、上样缓冲液均购自上海碧云天生物科技有限公司;鼠源增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、MYC、Bax、Bcl-2、L-PTGDS和PTGDR2单抗、鼠源GAPDH一抗及荧光标记的羊抗鼠二抗均购自北京博奥森生物技术有限公司;DAPI购自德国Thermo公司。1.2 MTT实验
分组及处理:收集生长至对数期的A549细胞,制……登录APP查看全文
