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结核杆菌RV1737多肽免疫特性和诊断价值研究

2021-08-04张万江陈创夫马雅静吴江东

安徽医科大学学报 2021年7期

宁 静,张万江,陈创夫,马雅静,吴江东,程 江

结核病仍旧是影响人类健康的传染病之一,潜伏结核感染(latent tuberculosis infection,LTBI)表现变化多端感染缺乏特异性,中国LTBI人数多,早期诊断与预防治疗刻不容缓。目前IGRA阳性是LTBI诊断指标,IGRA用早期分泌靶向抗原(ESAT-6)和培养滤过蛋白(CFP-10)作为特异抗原,寻找并研究新的蛋白抗原对结核病发病机制的理解及LTBI尽早发现诊断有重要意义。

抗原RV1737是潜伏期结核杆菌表达蛋白之一,是较好的T细胞相关候选抗原,而Th的表位对结核感染的诊断有很大潜力和优势,经软件预测并合成抗原RV1737多肽片段,进行IGRA检测方法的验证。多肽作为包被抗原建立ELISA检测结核抗体,方法简便快捷,一般病情越活跃、免疫应答反应越强、则抗体的阳性率会越高,进一步探讨多肽血清学诊断潜力。

1 材料与方法

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1 材料

经DNA star、Vector NT、Bepipred分析,表位序列由强耀生物公司多肽技术平台合成。序列的理化性质见表1。用ABC表示,对照抗原D为融合抗原 ESAT6-CFP10。

表1 多肽序列和理化性质

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2 样本纳入

多肽诱导细胞免疫反应的全血样本纳入:来自石河子大学附属医院感染科、呼吸科,分别分为3组:结核组(tuberculosis,TB)样本共24例,诊断符合《肺结核诊断和治疗指南》中标准: 影像学检查+结核中毒临床症状+实验室指标+抗结核治疗有效的人群;LTBI组样本18例,符合《WS196-2017结核病分类》的新增分组标准:为无免疫缺陷者测PPD大于10 mm或IGRA阳性者;对照组(healthy control,HC)样本17例来自健康体检人群,所有入选者均自愿参与研究,知情同意后采样,符合医学伦理规范。多肽建立间接ELISA,血清样本纳入:TB组,取患者血清作为阳性样本,共65例;……
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