张小路，杜梅红，彭银杰，万 鑫，张建刚，岳大成，刘 新，王世东

结肠癌(colon cancer，CC)是常见于结肠部位的消化道恶性肿瘤，发病率占胃肠道肿瘤第3位，病死率占所有恶性肿瘤的第5位，复发和转移是患者死亡的主要原因。因此，寻找治疗CC安全有效的方法，具有重要意义。

微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一种内源性非编码RNA分子，长度约为23个碱基的小分子单链RNA，对机体的基因表达调控具有重要作用。可作为恶性肿瘤诊断、预后判断的生物标志物以及临床治疗的重要靶点。Erkul et al的研究表明miR-21在喉癌的诊断方面具有重要作用；Yu et al指出miR-224可抑制PTX3蛋白表达防止宫颈癌的发生。其中，miR-302在肿瘤和炎症等方面的调控作用也备受关注。该实验探讨过表达miR-302诱导CC细胞SW480对炎症水平、线粒体氧化应激及裸鼠成瘤的影响，以期为CC的临床治疗提供新思路。

1 材料与方法

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1 材料

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实验细胞与动物 人CC细胞SW480购自北京中科院肿瘤细胞库。实验动物SPF级，无胸腺裸鼠12只，雄性，3周龄，体质量18～20 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，实验动物生产许可证号:SCXK(京)20170022，肿瘤造模前适应性饲养1周。

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试剂与仪器 RPMI 1640、0.25%胰蛋白酶、青/链霉素双抗、10%胎牛血清均购自美国Gibco公司；miRNA-302引物序列、miR-NC对照质粒、转染试剂盒、RNA提取试剂盒、BCA蛋白定量检测试剂盒、PCR试剂盒均购自武汉默沙克生物科技有限公司；丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、白介素(interleukin，IL)-6试剂盒、IL-1β试剂盒、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric ocide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factors，TNF)-α试剂盒均购自南京建成生物工程研究所；4%多聚甲醛固定液PBS缓冲液购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；……