张春雷 杨琦 周逢海 徐东波 康亚芬 常德辉

CDR1as(又称ciRS-7，hsa_circ_0001946)已被证明在包括肝细胞癌、肺癌、胰腺癌、卵巢癌等[1]在内的多种肿瘤疾病中发挥促进肿瘤进展的作用，在膀胱癌中通过CDR1as-miR-7-p21/CDR1as-miR1270途径发挥抗肿瘤作用[2]。CDR1as是目前研究广泛及功能强大的环状RNA(circular RNA, circRNA)，然而其在前列腺癌发生、发展中的作用目前尚无论证，我们通过对34例前列腺癌患者术后标本的癌及癌旁配对组织样本进行高通量测序，发现CDR1as在前列腺癌组织中显著低表达，说明CDR1as可能在前列腺癌的疾病发生及进展中发挥重要作用，对此，我们通过基因检测结合数据库分析，探索CDR1as在前列腺癌中可能的作用及机制。

材料与方法

一、前列腺癌患者组织标本获取及测序

选取就诊于中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院术后病理诊断为前列腺癌患者的肿瘤组织及癌旁组织(已通过医院伦理审核，审批编号：2020KYLL030)，一部分留作提取RNA，一部分送至测序公司进行测序，差异分析采用edgeR分析方法，差异表达标准为Fold change>2.0 且P值<0.05，细胞测序标准与之相同。

二、细胞培养

将细胞接种于含有4 ml(10%胎牛血清)培养液的培养瓶中，放于37 ℃、5% CO2条件下的培养箱中进行培养。RWPE1细胞培养在PEpiCM培养液中，LNCap细胞培养在RPMI-1640培养液中，PC3细胞培养在F-12(ham)培养液中，培养液每2天更换一次，细胞在生长到70%～80% 时用0.5 ml 0.25% 的胰蛋白酶/ EDTA室温下消化并传代。

三、siRNA干扰处理

常规消化细胞并计数，在6孔板中预铺1×105个细胞，1 d后至生长对数期，使用预热的OPTI-MEM配置转染试剂悬液和10 mmol/L干扰RNA(siRNA)悬液，按照说明书将混匀的转染试剂溶液滴加到培养液中，放入培养箱中继续培养。s……