陈 静，褚福浩，金珠措姆，索朗次仁，单增卓嘎

1 西藏藏医药大学，西藏 拉萨 850000；2 北京中医药大学

宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤疾病之一。全世界每年死于宫颈癌的女性超过20 万人。目前，该病的死亡率已攀升至女性癌病的第二位。藏药普尔那Artemisia vestitaWall.ex Bess.为菊科蒿属植物全草，具有清热解毒、杀虫利湿等功效，藏医临床常用来治疗虫病、脑炎、皮肤病、温毒疔毒疮、咽喉病等［1-5］，现代研究也用于治疗妇科疾病，如乳腺炎、慢性附件炎、痛经等［6］。查阅文献可知，藏药普尔那的化学成分有绿原酸［7］、熊果酸［8］、棕矢车菊素、柳穿鱼素、中国蓟醇、伞型花内酯和蓟黄素等，基于熊果酸、棕矢车菊素具有抗肿瘤活性［9-12］，本研究以四唑盐（MTT）比色法检测普尔那不同部位的乙酸乙酯提取物、石油醚提取物对宫颈癌海拉细胞（hela cell）的作用，为其科学、合理用药提供实验依据。

1 材料与仪器

1.1 实验细胞宫颈癌hela 细胞由中国科学院纳米科研中心提供。

1.2 试药RPMI-1640 培养基（HyClone，批号：AF29584257），DMEM培养基（Gibco，批号：8120350），0.25%胰蛋白酶溶液（Gibco，批号：2177715），磷酸盐缓冲液（Corning，批号：05717003）；胎牛血清（FBS，四季青，批号：20030502）；噻唑蓝（MTT，阿拉丁，批号：20170606）；二甲基亚砜（DMSO，天津百伦斯生物技术有限公司，批号：20170720）；青链霉素混合液（Gibco，批号：1640831）。

1.3 实验仪器3111 型CO2培养箱（Thermo）；生物安全柜（HFsafe）；酶标仪（Multiskan GO）；LD5-2B 型台式低速离心机（京立）；IX71 倒置荧光显微镜（Olympus）；96 孔板（Corning）；离心管（Costor）；其他耗材均为国产耗材。

2 实验方法

2.1 普尔那提取物制备分别取干燥的普尔纳根茎、叶的粉末10 g，加入10倍量80%乙醇，50℃、频率100%超声提取3次，每次1 h，滤过，合并提取液，提取液减压浓缩至无醇味。用水复溶，以乙酸乙酯萃取，萃取液减压浓缩至浸膏状态，烘干，称质量，得根茎乙酸乙酯提取物（GE）和石油醚提取物（GP）、叶乙酸乙酯提取物（YE）和石油醚提取物（YP）。……