王洋洋，佟若菲，孙燕燕

（天津市儿童医院，天津 300400）

清肺抑火片收载于《国家食品药品监督管理总局国家药品标准》WS3-B-0418-90-1中，由黄柏、大黄、黄芩等成分组成，具有清肺止嗽、降火生津功效，临床主要用于咳嗽、发热、便秘等症状。黄柏有效成分为盐酸小檗碱，大黄有效成分为大黄素和大黄酚。本研究采用双波长法同时测定该制剂中黄柏和大黄所含3个组分的含量，该方法专属性强，操作简单，可有效控制该制剂的质量［1］。

1 仪器与试药

1.1 仪器 岛津LC-2010AHT高效液相色谱仪，LC solution工作站。色谱柱：Agilent C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；梅特勒AB265-S电子天平；岛津UV2600紫外-可见分光光度计。

1.2 试药 乙腈（色谱纯，霍尼韦尔有限公司）、甲醇（分析纯，天津市鑫铂特化工有限公司）、磷酸（分析纯，天津市风船化学试剂科技有限公司）、水为纯化水。盐酸小檗碱对照品（中国食品药品检定研究院，批号110713-201814，含量86.7%），大黄素对照品（中国食品药品检定研究院，批号110756-201512，含量98.7%），大黄酚对照品（中国食品药品检定研究院，批号110796-201621，含量99.2%）。清肺抑火片（天津中新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂，批号200024、200034、200044；规格：0.61 g/片）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 采用Agilent C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为0.2%磷酸溶液，按表1的时间程序进行洗脱；柱温为35℃，进样量20 μl，体积流量为1.0 ml/min。理论板数按大黄素峰计算应不低于2 500。设定345 nm为盐酸小檗碱的检测波长，254 nm为大黄素和大黄酚的检测波长。

表1 梯度洗脱程序

2.2溶液的制备

2.2.1 对照品溶液制备 精密称取盐酸小檗碱对照品15.34 mg加甲醇溶解至20 ml量瓶中，称取大黄素对照品12.51 mg加甲醇溶解并定容至100 ml量瓶中，称取大黄酚对照品12.55 mg加甲醇溶解并定容至50 ml量瓶中，作为对照品储备液。……