韦 莹，陈丽芸，刘 闯，陈立军

（南宁海关技术中心，广西南宁 530021）

非洲猪瘟（African swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的一种急性、出血性、烈性传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为须通报动物疫病。该病也是我国重点防范的一类动物疫病。目前国内外ASF 疫情防控形势复杂多变[1]。ASF 在我国暴发以来，海关系统迅速反应，对边境口岸截获的猪肉及猪肉制品实行100% ASFV 核酸检测，旨在有效监控和防控病毒传播[2]。商品化检测试剂盒因其便捷性在实验室ASFV 快速检测中被广泛应用[3]。本试验拟通过实时荧光PCR 反应，对国内外不同厂家生产的6 种ASFV 检测试剂盒性能进行比较，从而进一步了解不同生产厂家试剂对试验结果的影响，以期为同行今后开展ASFV 核酸检测提供参考。

1 材料

1.1 样品

参考OIE 推荐的ASFV 荧光定量PCR 方法[4]合成引物和探针，对口岸截获的不同类型猪肉及猪肉制品进行检测。这些猪肉及猪肉制品经多次验证确定为ASFV 强阳性、中阳性及弱阳性样本，即为本试验样本。将检测Ct 值稳定在18～21 的样品划定为强阳性样本，Ct 值稳定在27～30 的样品划定为中阳性样本，Ct 值稳定在32～35 的样品划定为弱阳性样本。将这些不同类型的样本充分均质确保均一性。用全自动核酸提取仪，对不同样本进行核酸提取。最终获得较为稳定的强阳性、中阳性及弱阳性3 种ASFV 阳性核酸样本。另1 份不同于上述强阳性、中阳性、弱阳性样品的ASFV 阳性核酸，由本实验室之前保存备用。

1.2 试剂

6 种ASFV 荧光PCR 检测试剂盒分别购自国内外不同生产厂家，均在效期内。……