孙志军，吴 丹，张俊婷，郑 琴，张群林*

（1. 安徽医科大学 药学院，安徽 合肥 230032；2. 江西中医药大学 现代中药制剂教育部重点实验室，江西 南昌 330004）

冰片包括天然冰片和合成冰片，天然冰片由樟科植物樟Cinnamomum camphora(L.) presl的新鲜枝、叶经提取加工制成。冰片在古籍中多以“龙脑香”“龙脑”为正名。宋代《本草衍义》记载：“此物大通，利关膈热塞，其清香为百药之先”。明代《本草纲目》记载：“龙脑香，释名片香、羯婆罗香。辛、苦，微寒，无毒。疗脑痛，通诸窍，散郁火”。研究表明冰片可通过镇痛[1]、抗炎[2]、抗氧化[3]和抗癫痫[4]等机制发挥神经保护作用，从而改善局灶性脑缺血[5]、阿尔茨海默症[6]等神经系统疾病导致的神经功能损伤。PC12细胞是一种可显示多种神经元特性的神经细胞株，已被广泛应用于神经系统疾病的体外研究[7-9]。6-OHDA是一种常见的用于实验模拟黑质变性的神经毒素[10]。本实验将建立6-OHDA诱导的PC12细胞损伤模型，用于研究天然冰片是否对PC12细胞具有保护作用，分别利用MTT法、倒置显微镜和流式细胞仪来检测细胞存活率、观察细胞形态以及检测细胞凋亡情况。

1 材料与方法

1.1 试药与仪器

天然冰片（批号：20170112）购于吉安市聚鹏天然香料油有限公司；6-OHDA（批号：18834）购于美国MCE生物科技公司；Annexin V-FITC/PI试剂盒购于上海贝博生物科技有限公司；DMEM高糖培养基购于上海源培生物科技股份有限公司；胎牛血清、青霉素-链霉素溶液（100 ×）、胰酶购于中国碧云天生物有限公司；噻唑蓝（MTT）购于西格玛奥德里奇贸易有限公司；二甲基亚砜（DMSO）购于国药化学试剂有限公司；……