陆 游，南文龙，巩明霞，李 林，邹艳丽，吴晓东，彭大新，陈义平*

(1. 扬州大学兽医学院，江苏扬州 225009；2. 中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032)

牛结节性皮肤病(Lumpy skin disease，LSD)是一种由羊痘病毒属牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus, LSDV)引发的急性、亚急性传染病[1]。该病临床表现为皮肤水肿及局部坚硬的结节、结痂或溃疡，怀孕牛流产，奶牛产奶量减少，公牛暂时或永久不育，商品牛的肉质或皮张利用率明显下降[2-3]。2019年8月，LSD疫情首次发生于我国新疆伊犁州，2020年6月以来，我国福建长汀、江西赣州、广东潮州、安徽黄山、浙江金华等地又确诊发生该疫情[4]。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告的动物疫病，农业农村部暂时将其作为二类动物疫病管理。

根据《牛结节性皮肤病防治技术规范》，我国采用山羊痘弱毒疫苗AV41株，按山羊的五倍剂量免疫牛来预防LSD[5]。但弱毒疫苗的使用可对LSDV野毒的诊断和监测产生干扰[6-7]。当前尚无AV41株的特异性鉴别检测方法，本研究拟筛选、验证AV41株基因组独特性分子标记，为该疫苗株与我国LSDV野毒株的鉴别提供分子依据。

1 材料与方法

1.1 毒株 山羊痘弱毒疫苗AV41株购自哈药集团生物疫苗有限公司、山东绿都生物科技有限公司，山羊痘病毒+小反刍兽疫病毒二联弱毒疫苗(AV41株+Clone 9株)购自华派生物工程集团有限公司。中国LSDV野毒株LSDV/China/XJ2019-1由中国动物卫生与流行病学中心分离鉴定。

1.2 试剂与仪器 磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒购自TIANGEN公司，PCR扩增试剂2×Taq Plus Master Mix(Dye Plus)购自Vazyme公司，毛细管电泳仪及DNA Marker购自QIAGEN公司，引物由睿博兴科(青岛)有限公司合成。……