周 杨,东 丽,刘佳佳,刘 伟*

(1内蒙古自治区人民医院放疗科,呼和浩特 010010;2内蒙古自治区人民医院肿瘤内科;*通讯作者,E-mail:18047192753@163.com)

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界范围内常见的肿瘤之一。目前用于治疗HCC的抗癌药物毒性大,生存率低,疗效不理想。这主要是由于缺乏对HCC发生和发展的生化和分子机制了解。有研究观察到,与正常或周围非肿瘤组织相比,5型磷酸二酯酶(phosphodiesterase-5 inhibitors,PDE5)在癌症中表达明显增加[1]。由此表明PDE5可能对某些类型肿瘤具有抗癌活性,并可能增强癌细胞对标准化疗药物的敏感性。最近有文献表明,在体外,2 μmol/L西地那非、索拉非尼和雷戈拉非尼增强了HepG2、HEP3B和HuH7细胞凋亡,而他达拉非(100 μmol/L)抑制了人肝癌细胞系HEP3B和PLC/PRF/F中髓源性抑制细胞,并增加了细胞因子诱导的杀伤细胞活性[2]。已有研究表明,西地那非通过增加细胞内活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS),诱导细胞周期阻滞和凋亡,从而抑制人结肠癌细胞株的生长[3]。因而,本研究旨在评估PDE5抑制剂西地那非在二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导大鼠HCC中的抗癌作用。

1 材料和方法

1.1 主要试剂

DEN和PDE5(美国Sigma公司);谷胱甘肽S-转移酶活性(glutathione S-transferase,GST)和甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)(美国Sigma公司);HE染料(美国Sigma公司);氧化应激标记物检测试剂盒(南京建成生物工程研究所有限公司)。

1.2 实验动物分组及处理

雄性Wistar大鼠(150-180 g),购于内蒙古医科大学实验动物中心(动物许可证号:SCXK(蒙)2015-0001)。将Wistar大鼠随机分成3组:对照组、DEN组和PDE5+DEN组,每组均10只。对照组大鼠在实验期间(1-18周),每周腹腔注射0.2 ml生理盐水;DEN组大鼠在18周内,每周腹腔注射0.2 ml DEN溶液(50 mg/kg)。PDE5+DEN组大鼠在18周内,每周腹腔注射0.2 ml DEN溶液(50 mg/kg),同时腹腔注射PDE溶液(10 mg/kg)。……