冯俊博，程永波

(新疆医科大学第一附属医院消化一科，乌鲁木齐 830000；*通讯作者,E-mail:chengyb2001@163.com)

放射治疗是治疗恶性肿瘤常用手段之一，但是在杀灭癌细胞的同时，对正常的血管内皮细胞也会产生不良影响，医学上称为放射性血管损伤，血管内皮细胞的纤维化是其主要的病理特征[1,2]。可以肯定的是，由转化生长因子TGF-β所介导的TGF-β-ALK5-Smad2/3信号通路与内皮细胞的纤维化有着密切的联系[3]。已有文献报道，TGF-β1可作为诱导剂激活细胞内的TGF-β-Smad2/3信号通路，诱导内皮细胞间充质转化(EndoMT)的发生，最终导致内皮细胞纤维化[4-6]。但是就目前而言，对于该通路的上游靶点TGF-βⅠ型受体ALK5的相关研究较少，它作为一种丝氨酸-苏氨酸激酶，存在于细胞膜上。本研究提出假设，当使用X射线辐照内皮细胞后，细胞膜上的ALK5被激活，从而诱导下游的Smad2/3发生磷酸化，调控整个纤维化的进程。因此，研究辐照后内皮细胞ALK5的表达变化以及使用RepSox(一种ALK5选择性抑制剂)进行干预，有助于我们深入地了解辐照后内皮细胞发生纤维化与该信号通路的联系，为防治放射性血管损伤提供新的靶点和理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂 ECM培养基购自美国ScienceCell公司；CCK-8试剂盒购自中国Biosharp公司；RIPA裂解液购自中国Solarbio公司；PMSF蛋白酶抑制剂购自中国Solarbio公司；BCA蛋白定量试剂盒购自美国Thermo公司；SDS-PAGE凝胶制备试剂盒购自中国Solarbio公司；ALK5、p-Smad2/3一级抗体购自英国Abcam公司；GAPDH一级抗体购自中国博奥森公司；二级抗体购自中国博奥森公司；荧光二级抗体Alexa Fluor 594购自中国中杉金桥公司；ReverAid First Strand cDNA Synthesis Kit购自美国Thermo公司；……