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藁本内酯抑制RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化及其与GPER相关机制

2021-07-14崔杰李梦雨刘雨彤毛洪运林紫微杨菲华永庆

南京中医药大学学报 2021年4期
关键词:检测

崔杰,李梦雨,刘雨彤,毛洪运,林紫微,杨菲,华永庆,3

(1.江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,江苏 南京 210023;2.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;3.江苏省中药药效与安全性评价重点实验室,江苏 南京 210023)

骨质疏松症(OP)是一种全身性骨代谢疾病,主要表现为骨量降低,进而导致骨折风险增加。我国65岁以上人群OP患病率达到32%,其中女性患病率高达51.6%[1]。骨代谢平衡是维持骨量的重要前提。在OP发生早期阶段,破骨细胞的过度激活干扰了成骨细胞和破骨细胞之间的动态平衡,是造成骨丢失并导致OP最关键的原因。目前靶向破骨细胞分化是预防OP的主要治疗策略[2],临床上的代表性药物主要是双磷酸盐类、雌激素类等,但长期使用易引起颌骨坏死、非典型骨折等严重副作用[3]。

中医药治疗OP具有疗效确切,不良反应少等独特优势[4]。当归是中医药治疗OP最常用的药物之一[5],具有补血活血、调经止痛等功效。藁本内酯(LIG)是当归中最主要活性成分之一,在其挥发油中含量可达45%~70%[6]。我们前期研究发现,LIG可通过G蛋白偶联雌激素受体(GPER)信号通路促进成骨细胞分化,发挥骨保护作用[7]。本文旨在观察LIG对破骨细胞形成及分化的影响,并进一步探讨其与GPER相关的作用机制。

1 材料

1.1 药品与试剂

RAW264.7细胞购自中国科学院上海细胞库;藁本内酯(上海源叶生物有限公司,批号:ZT-71536,纯度:98%);17β-雌二醇(E2,Sigma公司,批号:E8875);RANKL(近岸蛋白质科技有限公司,批号:CR06);G36[爱必信(上海)生物科技有限公司,批号:MA27];Trizol、逆转录试剂盒、扩增试剂盒(南京诺唯赞生物科技有限公司,批号:R401-01,R223-01-AB,Q111-02-AA);……

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