魏丹红 徐红

1.宁海县妇幼保健院 浙江，宁海 315600 2.上海中医药大学中药研究所

金钗石斛（Dendrobium nobile Lindl.）为兰科石斛属多年生附生草本植物，主要分布于我国台湾、海南、福建、湖南、湖北、广东、广西、贵州、云南、四川等亚热带地区[1]。金钗石斛是中药石斛的常用品种之一，为历版《中国药典》的石斛收载品种，具有益胃生津、滋阴清热、强阴益精、久服厚肠胃等功效[2-3]。近三十年来由于过度采挖利用和人为生境破坏，野生金钗石斛资源遭到严重破坏，野生居群规模锐减。为满足药用需求，近几年在金钗石斛的分布地贵州、四川、重庆等地已经开始规模性的金钗石斛人工栽培，一定程度上缓解了资源紧缺的状况。近来有学者用序列相关扩增多态性（sequence-related amplified polymor-phism，SRAP）分子标记[4]和简单重复序列间扩增（inter simple sequence repeat，ISSR）[5]技术研究金钗石斛的遗传多样性，然而研究取样仅局限于贵州地区和秦巴地区，产地缺乏代表性。ISSR技术以聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术为基础，根据真核生物中广泛存在1～6个碱基的简单重复序列（simple sequence repeat，SSR）的特点，对SSR之间的一段DNA序列进行扩增，检测SSR序列间的DNA序列差异。与SRAP分子标记、随机扩增多态DNA（random amplified polymorphic DNA，RAPD）比较，该技术检测的遗传多态性丰富，具有简单快速、重复性及稳定性高等优势，是研究药用植物遗传多样性的常用分子标记[6-7]。因此，本研究拟运用ISSR分子标记技术对我国主要产区的21个居群的152个金钗石斛样本进行分子水平的遗传多样性研究，探明其遗传多样性现状，为金钗石斛种质资源的保护和新品种选育提供参考。……