人尿液细胞的培养及生长特性分析
2021-07-07阮愕舒石兰岚王廷华杨建宇
阮愕舒,王 烁,石兰岚,2,王廷华,2,杨建宇*
(1.昆明医科大学基础医学院;2.昆明医科大学动物学部,云南 昆明 650500)
尿液作为生理排泄物,尿液中除了含有水、无机盐与糖外,还含有一些人尿液细胞(Human urine cell,HUC)和极少量的尿源性干细胞等,其中,HUC主要包括脱落的尿道上皮细胞、肾小管上皮细胞,也为肾细胞[1]。HUC可以通过一定的方法和小分子物质在体外进行增殖培养[2],同时,大量的H统称UC可在体外通过一些细胞因子和小分子物质进一步经诱导转分化为肝细胞、胰岛细胞或者神经细胞[3]等具有一定临床应用价值的成体细胞,由于HUC具有易得、无创性、无排斥反应及不涉及伦理问题等优点,为成体细胞治疗疾病提供丰富、易得和可靠的细胞来源。HUC还可以用于脊髓性肌萎缩症等疾病的诊断和发病机制研究[4-5]。我们拟建立一种可行、可靠、系统性的HUC培养体系,分析HUC的生长特性,拟为将来利用HUC体外转分化为所需要成体细胞后进行临床细胞移植治疗疾病提供大量HUC。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 基本材料 移液器一套及各种吸嘴,各种规格的培养板、培养瓶,50 mL和15 mL的离心管等。将以上实验材料提前在紫外线照射下灭菌,对培养板用明胶包被后放入37℃、5%CO2培养箱中孵育备用。
1.1.2 细胞培养用材料 明胶Gelatin,Dulbecco′s Modified Eagle Medium(DMEM)/F12,青霉素和链霉素,胎牛血清,Renal Epithelial Cell Growth Basal Medium(REBM)和Bullet Kit小分子套装(CC-3190,LONZA),台盼蓝。
1.2 实验方法
1.2.1 采集尿液样本 在尿液取样室中,用取样瓶取新鲜人尿液43份,记录尿液捐献者年龄、性别以及捐献的尿液量。尽快对尿液样本进行细胞的分离和培养。……
