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非洲猪瘟病毒胶体金免疫层析试纸条的研制

2021-07-06邬旭龙张鹏飞江地科

中国兽医杂志 2021年2期
关键词:检测

邬旭龙 , 刘 波 , 王 印 , 张鹏飞 , 江地科 , 肖 璐

(1. 成都农业科技职业学院 , 四川 成都 611130 ; 2. 四川农业大学动物医学院 动物疫病与人类健康四川省重点实验室 , 四川 成都 611130 ; 3. 四川省畜牧科学研究院 动物遗传育种四川省重点实验室 , 四川 成都 610066)

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪的急性传染病[1]。ASFV属非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae),是虫媒病毒中唯一的DNA病毒,临床表现与猪瘟极其相似[2],以急性高热为特点,伴有全身及内脏器官出血,猪群一旦感染,强毒株可引起100%死亡率[3]。临床症状从急性、亚急性和慢性不等,表现为高热、皮肤发绀、呼吸障碍和神经症状等[4-5],病症最急性型可感染任何年龄和品种的猪群,通常出现在初次感染猪场,猪群感染后3~7 d可出现死亡[6],对养猪业造成巨大经济损失,目前仍无有效的ASF疫苗进行预防,该病被世界动物卫生组织列为实时通报的动物疾病,我国将其列为一类动物疫病。

胶体金技术从20世纪70年代开始,逐渐在各不同学科领域开展研究和应用[7-9]。基本原理[10]是由于胶体金颗粒表面带有负电荷,因而可以通过静电作用吸附带有正电的物质,胶体金标记的抗原或抗体在毛细作用下在硝酸纤维素膜中移动并与相应的抗体或抗原作用反应结合,从而导致大量胶体金颗粒的聚集,进而呈现显色反应。ASFV pK205R蛋白是ASFV的主要抗原之一[11-12],可以诱导机体产生较强的免疫反应,该研究通过原核表达ASFV pK205R蛋白并制备多克隆抗体,初步建立检测ASFV的胶体金免疫层析试纸条检测方法,该方法快速、便捷,且具有较好的特异性,为非洲猪瘟病毒临床检测技术研究提供基础。……

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