宋子华 万维松 杨春蓉 王晓璐

(三峡大学 第一临床医学院[宜昌市中心人民医院] 病理科 & 三峡大学 病理学研究所， 湖北 宜昌 443003)

近年来由于各种免疫抑制剂、肿瘤化疗药物和糖皮质激素的广泛使用，使得真菌感染发病率不断上升，尤以肺部真菌感染居首位[1]。由于部分患者的症状和影像学表现缺乏特征性，病原体检测有助于患者的确诊和治疗[2]。通过HE染色法进行病理诊断往往耗时长且阳性率低。另外，尽管实时荧光定量PCR对于真菌检测敏感性高，但对实验室硬件要求高、费用昂贵且操作过程中易污染。因此在临床实践中，特殊染色对于诊断真菌感染仍然是经典方法。六胺银(periodic acid-silver methenamine，PASM)染色法是一种临床常用的重要特殊染色技术[3-6]。通过PASM染色观察曲霉菌和毛霉菌的菌丝有无分隔，分支的角度以及染色强度，有助于区别曲霉菌和毛霉菌[7]。但PASM染色受多种因素影响，本研究比较了目前临床工作中两种常用的PASM染色孵育方法在不同时间点对真菌染色的效果。

1 材料与方法

1.1 材料

收集2017年1月～2018年4月在我院病理科确诊的真菌感染病例标本。

1.2 试剂与仪器

试剂：六胺银试剂盒购自珠海贝索生物技术有限公司，内含高碘酸溶液、硼砂、六次甲基四胺银粉剂、硫代硫酸钠溶液，以及伊红染液。每次染色前，将其中一瓶硼砂溶液与一瓶六次甲基四胺银粉剂混合成一份工作液，即用即弃。仪器：全自动超声组织处理系统(型号HT-3)、HH-S2数显恒温水浴锅及立式染缸。

1.3 方法

①切片、烤片：同一标本分为两组，将石蜡包埋组织样本3 μm连续切片10张，烤片30 min；……