卢霞，许旭

宫颈癌在中国已成为中青年女性的第二大高发恶性肿瘤，每年新发病例占全球病例的28%以上[1]。沉默信息调节因子1(silent information regulator 1，SIRT 1)是一种组蛋白去乙酰化酶，是调节细胞应激、诱导细胞凋亡的重要分子[2]。临床研究表明SIRT1随宫颈病变的加重表达升高，对宫颈癌的发生和发展发挥促进作用，且SIRT1表达与宫颈癌的不良临床预后相关；体外实验发现SIRT1在人乳头状瘤病毒(human papilomavirus,HPV)感染的宫颈癌细胞中过表达[3-4]。然而SIRT1促进宫颈癌发生发展的具体作用机制目前尚不明确。核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2，Nrf2)信号通路可通过调节机体氧化应激维持细胞的正常生理活动，Nrf2异常激活会引起Nrf2蓄积，导致Nrf2下游产物增多，增加肿瘤细胞对化疗药物的耐受性[5]。有研究发现，Nrf2蛋白在宫颈癌组织和细胞中高表达，上调Nrf2促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭，下调Nrf2的表达后可抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移，促进细胞凋亡[6]。据报道，SIRT1在细胞氧化还原平衡和抗氧化应激中起重要作用，Nrf2的表达可受到SIRT1的正调控[7]。因此本研究探讨SIRT1调控Nrf2信号通路对宫颈癌细胞增殖、凋亡及迁移侵袭的影响，从分子角度阐述SIRT1促进宫颈癌发生发展的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验试剂

宫颈癌细胞株Hela细胞购自美国ATCC、胎牛血清购自美国Gibco公司、RPMI-1640培养基购自北京天润善达生物科技有限责任公司、TRIzol Reagent购自美国Invitrogen公司、SIRT1、Nrf2、NQO1、GAPDH普通PCR上下游引物购自广州华大生物科技有限公司、SYBR Green PCR Master Mix购自TaKaRa、RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit购自Thermo Scientific、RIPA裂解液购自上海申能博彩生物科技有限公司、BCA蛋白浓度测定试剂盒购自Thermo公司、SIRT1单克隆抗体、Nrf2单克隆抗体、NQO1单克隆抗体、HO-1单克隆抗体均购自美国Abcam公司、HRP标记山羊抗兔IgG购自美国Santa Cruze公司。……