白亚萍，裴文俊，吴亚丽，闵 娇，花长春，刘 洁，章 尧

(皖南医学院 1.安徽省生物大分子研究重点实验室；2.生物化学与分子生物学教研室；3.药学院；4.临床医学院；5.医学影像学院，安徽 芜湖 241002)

近年来，急性肾损伤和慢性肾病对人类产生了严重威胁并被上升为世界性公共卫生问题[1]。研究表明，肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs)的状态在慢性肾脏疾病进展过程中发挥着重要作用，其强调受损的RTECs可以直接促进间质炎症和纤维化的发展[2]。此外，RTECs的异常凋亡水平或坏死是急性肾损伤早期的主要特征之一[3]。

作为载脂蛋白家族成员之一，载脂蛋白M(apolipoprotein M,ApoM)的研究主要集中在糖脂代谢及抗动脉粥样硬化方面[4]。前期研究发现ApoM基因的下调促进了小鼠肾小球系膜细胞的凋亡[5]，但ApoM的表达水平对RTECs的影响尚无报道。值得注意的是，ApoM主要在肝实质细胞和RTECs中高表达[6-7]。本研究将系统地探究ApoM基因下调对RTECs增殖及凋亡的影响，为肾脏疾病的防治提供新的理论依据，并进一步丰富ApoM的功能研究。

1 材料与方法

1.1 实验动物 委托上海南方模式生物研究中心，利用Crispr-Cas9 技术构建 ApoM(+/-)模型小鼠模型；实验用野生型小鼠购自南京青龙山。成年C57BL/6J雄性和雌性ApoM(+/-)小鼠(3～4月龄)通过合笼繁育获得ApoM基因纯合子(-/-)小鼠。本研究动物实验方案经皖南医学院实验动物福利与伦理委员会批准。

1.2 C57BL/6J小鼠鼠尾基因型鉴定 取16只8周龄左右的C57BL/6J小鼠，剪其尾巴放至1.5 mL EP管中，加入裂解液A和蛋白酶K，55℃金属浴过夜直至其完全裂解，加入无水乙醇和裂解液B。将上述……