朱丽华，章忠明，李 薇，冯 霞，王 芃，刘兰燕

(1.广西医科大学第一附属医院 a.体检部 健康管理部; b.血液内科,广西 南宁 530021;2.中山大学附属东华医院 传染病科,广东 东莞 523110;3.广西医科大学 基础医学院，广西 南宁 530021)

急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)为临床常见的急危重症，特征是毛细血管屏障通透性增加，引起连续性肺水肿、气体交换障碍和呼吸窘迫等症状[1-3]。巨噬细胞活化后可被分为两种不同的表型：即具有促炎作用的 M1 型巨噬细胞和具有抗炎作用的M2 型巨噬细胞。研究表明，巨噬细胞可通过调节炎症进程，促进炎症消退和启动肺修复来预防ARDS中的破坏性过程[4-5]。NecroX化合物是一类由吲哚衍生的具有细胞保护作用的细胞渗透性坏死抑制剂，可通过线粒体ROS清除发挥抗氧化活性。NecroX-5可有效抑制氧化应激引起的细胞损伤和死亡[6]，并对肝脏疾病和神经退行性疾病等具有治疗作用[7]。本实验通过NecroX-5干预ARDS大鼠探讨其作用，并阐明这种抑制的分子机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 NecroX-5(美国Biovision)，LPS(美国Sigma)，TNF-α、IL-6、IL-23、iNOS ELISA检测试剂盒(南京建成)，ECL发光液、HE 染色试剂和免疫组化染色试剂(北京索莱宝)，RNAiso Plus试剂(美国Thermo Fisher)、SYBR®Prime ScriptTMRT-PCR Kit 试剂盒和SYBR Premix Ex Taq Ⅱ 试剂盒(日本Takara)，BCA蛋白定量试剂盒与PVDF膜(上海碧云天)，抗体CD86、iNOS、HMGB1、RAGE、β-actin(英国Abcam)，FITC标记 CD11c+抗体(美国 BD)。

1.2 实验细胞与动物 巨噬细胞系RAW264.7来源于中国科学院上海细胞库。40只雄性SPF级Sprague-Dawley(SD)大鼠购自广西医科大学实验动物中心，体质量180～220 g。

1.3 动物分组、给药与造模 40 只SD大鼠随机分为对照组、NecroX-5组、LPS组、NecroX-5+LPS组，每组10只。NecroX-5组和NecroX-5+LPS组大鼠造模前7 d腹腔内注射NecroX-5(10 mg/kg)诱导大鼠ARDS模型，每天1次，连续7 d，对照组和LPS组同时注射等量生理盐水。……