高文明 李嘉铮 王慧青 董 康 孟 尧 程葆华△

(1济宁医学院基础医学院；2济宁医学院临床医学院，济宁 272000；3山东大学齐鲁医学院，济南，250014)

帕金森病(Parkinson’s disease，PD)是最常见的神经退行性运动障碍性疾病，以运动和非运动症状为主要临床表现[1]。以中脑黑质致密部(substantia nigra pars compacta，SNpc)多巴胺能神经元进行性丢失，残存的多巴胺神经元内出现路易小体为主要病理学特征[2]。PD发病的确切机制尚不十分清楚，现有的证据表明线粒体功能损伤与PD 的病理生理学有关[3]。凋亡是最常见的程序性细胞死亡形式，与线粒体功能密切相关，原因是内在的凋亡途径与线粒体去极化有关[4]。6-OHDA是儿茶酚胺的羟基化衍生物，其结构与儿茶酚胺类似，是一种有效导致多巴胺神经元变性的神经毒剂，广泛用于选择性儿茶酚胺能神经毒剂作用的细胞或者动物PD模型[5]。

Ghrelin又名胃饥饿素，是生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor，GHS-R)的唯一内源性配体[6]。Ghrelin可促进生长激素释放，参与多种内分泌调节过程，具有抗凋亡、抗氧化作用，可以拮抗1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡喃(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyran，MPTP)所致的神经毒性，发挥神经保护作用[7-9]。Ghrelin对于6-OHDA所致的线粒体损伤和细胞凋亡的作用还有待研究。本实验通过6-OHDA处理人神经母细胞癌细胞(SH-SY5Y细胞)，构建PD体外模型，观察Ghrelin对线粒体功能和细胞凋亡的影响，探究其神经保护作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1试剂 Ghrelin(美国Phoenix Pharmaceuticals公司)；SH-SY5Y细胞(美国菌种保藏中心)；6-OHDA(美国Sigma公司)；DMEM培养液(美国Hyclone公司)；CCK-8(日本Dojindo公司)；LDH(中国南京建成生物有限公司)；线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)(中国江苏凯基有限公司)；……