邱 勰 雷铁池 韩冰玉 姚云竹 廖志凯 胡双海

武汉大学人民医院皮肤性病科，湖北武汉，430060

皮肤老化一般被分为自然老化和光老化，通常具有皱纹形成、皮肤松弛、色素沉着等改变。目前临床上已经采用了如光子嫩肤、玻尿酸注射等方式来预防或延缓皮肤老化，但具有时效短、不良反应多等局限性[1]。有研究发现，在人眶周皮肤注射自体培养FBs后，皮肤张力明显改善[2]，这表明细胞注射治疗在改善皮肤老化方面已经表现出一定的价值。

最近，用单细胞RNA测序技术(single-cell RNA sequencing)发现人和鼠的真皮FBs存在异质性。位于真皮浅层的乳头层成纤维细胞(papillary FB)和位于深层的网状层成纤维细胞(reticular FB)在细胞表型和生物学功能上有较大差异[3,4]。网状层FBs比乳头层FBs分泌胶原蛋白的能力更强，而乳头层FBs的增殖能力比网状层FBs强[4]。随着皮肤老化，乳头层FBs逐渐消失。还发现体外培养的乳头层FBs分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的能力在老年人中明显高于年轻人[4]。由于小鼠胚胎第18.5天(E18.5)[5]的真皮含乳头层FBs高达81.8%[4]。我们的假说是自胎鼠(E18.5)皮肤分离培养FBs，经CM-Dil荧光染料活细胞标记后皮下注射至光老化小鼠的皮肤，检查同种异体小鼠FBs注射是否具有抗老化作用，旨在探索下一步用自体真皮成纤维细胞治疗(autologous dermal fibroblast therapy)抵抗人皮肤衰老的可行性与机制。

1 材料与方法

1.1 材料收集 取BALB/c健康雄性小鼠20只(购自湖北省动物实验中心)，随机分为：未处理组5只、仅做照光处理的模型组5只、照光处理后注射PBS的空白组5只、照光后进行细胞治疗的治疗组5只，所有小鼠均用冰王脱毛膏脱去背部5 cm×6 cm面积的毛发。……