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当归、川芎联合应用对肺纤维化模型大鼠TGF-β1/Smad 信号通路的影响

2021-06-26王丽娟董小鹏

中成药 2021年6期
关键词:肺纤维化模型

王丽娟,董小鹏,杜 弢

(1.甘肃中医药大学,甘肃 兰州 730000;2.甘肃中医药大学附属医院,甘肃 兰州 730020)

肺纤维化是多种原因引起的慢性肺部疾病的共同结局,一旦形成很难逆转,其死亡率甚至高于某些癌症[1]。目前,肺纤维化常用的治疗药物如糖皮质激素、免疫抑制剂等毒副作用较大。研究表明,中草药在治疗肺纤维化方面有一定应用价值[2-4],当归与川芎单独使用时对于肺纤维化有作用,但两者合用时能否起到协同作用尚未有实验报道。本研究通过检测当归、川芎及其不同配比对肺纤维化模型大鼠肺功能、肺组织病理形态学改变、肺组织TGF-β1/Smad 信号通路的影响,以筛选两者最佳配比,并探讨其潜在机理。

1 材料

1.1 动物 SPF 级SD 大鼠80 只,雄性,体质量(160±20)g,购自甘肃中医药大学SPF 级动物实验中心,实验动物生产许可证号SCXK(甘)2015-0002。

1.2 试剂与药物 博来霉素(北京索莱宝科技有限公司);醋酸泼尼松片(天津天药药业股份有限公司)。当归、川芎均购自甘肃中医药大学附属医院,经甘肃中医药大学杜弢教授鉴定分别为伞形科植物当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels 的根、伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的根茎。TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB 双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(北京博奥森生物技术有限公司);羟脯氨酸检测试剂盒(南京建成生物工程研究所);TGF-β1、Smad2、Smad3、α-SMA一抗,二抗、SABC 免疫组化染色试剂盒、DAB 显色试剂盒(AR1022)(武汉博士德生物工程有限公司);TRIzol(美国Invitrogen 公司);反转录试剂盒及荧光定量试剂(日本TaKaRa 公司);PCR引物(上海生工生物工程有限公司合成)。

1.3 仪器 WPB PLT-UNR-RT-2 型动物肺功能检测系统(法国EMKA 公司);……

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