李明芬，潘爱萍，林英辉，陈柳燕，李 屏，杨 利，邓增富，谢杨益，林洪升*

（1.广西中医药大学第一附属医院检验科，广西 南宁 530021；2.广西中医药大学，广西 南宁 530200）

肝细胞性肝癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）是一种高度恶性肿瘤，也是世界上由癌症引起相关性死亡的第三个原因［1]。同时，HCC 也是我国癌症中的第二号杀手［2]，严重威胁国人健康，并造成严重的社会经济负担。鳖甲煎丸出自东汉医家张仲景所著《金匮要略》，具有抵抗肿瘤、治疗纤维化和调节人体免疫力等作用［3-4]，其防治原则主要包括清热凉血解毒、疏肝理气、活血化瘀、清化湿热和祛瘀理气等。但目前关于鳖甲煎丸治疗肝癌的分子机制研究较少，作用机制未明。本研究通过制备鳖甲煎丸含药血清干预肝癌细胞，通过全细胞转录组学分析微小RNA（MircoRNA，miRNA）和信使RNA（Messenger RNA，mRNA）表达谱，构建miRNA-mRNA 网络及其相关的信号通路，旨在为探索中医药治疗肝癌提供新思路和新的靶点。

1 材料

1.1 动物 60 只SPF 级SD 雄性大鼠，体质量（201.38±17.57）g，均购于广西医科大学动物实验中心，使用许可证号SYXK（桂）2013-0005。所有操作都在国家实验动物使用标准下进行。

1.2 药物 鳖甲煎丸购于武汉中联药业集团股份有限公司，国药准字Z42020772（批号160400），组方药材鳖甲胶、阿胶、蜂房（炒）、土鳖虫（炒）、鼠妇虫、蜣螂、大黄、桃仁、牡丹皮、射干、黄芩、柴胡、干姜、白芍（炒）、桂枝、葶苈子、石韦、厚朴（姜制）、瞿麦、姜半夏、硝石（精制）、党参。

1.3 试剂 DMEM 培养基购于Gibco 公司（美国，批号8169175）；胎牛血清购于Gibco 公司（美国，批号1828728）；CCK-8 试剂盒购于同仁公司（日本，批号6972-75-8）；细胞总RNA 提取试剂盒RNeasy mini Kit 购于Qiagen 公司（德国，批号74104）；……