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鸡毒支原体与滑液囊支原体双重PCR检测方法的建立与应用

2021-06-24朱小甫吴旭锦李怡婷

动物医学进展 2021年6期
关键词:检测方法

朱小甫,吴旭锦*,李怡婷,孙 凯

(1.咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所,咸阳市动物疫病分子生物学诊断技术研究重点实验室,陕西咸阳 712000;2.旬邑县动物疫病预防控制中心,陕西旬邑 711300;3.西咸新区凯歌牧业有限公司,陕西咸阳 712000)

鸡毒支原体(Mycoplasmagallisepticum,MG)主要引起鸡慢性呼吸道病(Chronic respiratory disease,CRD),以流鼻涕、咳嗽、结膜炎和气囊炎为特征[1-2]。滑液囊支原体(Mycoplasmasynovialum,MS)可侵害鸡关节滑液囊膜及腱鞘,引起渗出性滑膜炎、腱鞘炎及附关节和脚垫肿胀,此外还会造成生长发育迟缓、产蛋下降,并且与呼吸道疾病有关[3-4]。MG和MS既可水平传播也能垂直传播,在鸡群中净化难度较大。自2017年以来,鸡群支原体感染呈急剧上升趋势,造成临床上呼吸道问题以及产蛋下降和关节肿胀引起的瘫痪等问题层出不穷,严重影响了鸡群正常生产,养殖场经济损失较大[5-7]。

由于支原体实验室培养难度大、生长缓慢、分离鉴定耗时过长,甚至多数情况下难以分离成功,给支原体病确诊造成很大困扰[8]。此外,支原体诊断常用血清学方法,但由于血清学方法敏感性较低、存在非特异性反应干扰等缺点,诊断的准确性不足。因此,为了对MG和MS准确诊断,需要开发更为准确特异的诊断方法。秦璐璐等[9]根据MG特异性序列fMG-2设计1对引物,建立了检测鸡毒支原体的PCR方法,对MG的最小检出量为3 pg/μL,用建立的PCR方法对临床采集的样品进行检测,同时对相应的样品进行细菌分离,结果PCR的阳性检出率为20.5%,细菌分离培养的阳性率为0.9%,表明PCR的敏感性高于细菌分离鉴定。……

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