卢锦标，都伟欣，苏城，沈小兵，陈保文，蒲江，赵爱华

1.中国食品药品检定研究院结核病疫苗和过敏原产品室中国医学科学院生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京102629；2.安徽智飞龙科马生物制药有限责任公司,安徽合肥230039

纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)皮肤试验自问世以来,一直是结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染筛查的主要手段,由于其操作简单,成本低廉,可实现基层大规模人群检测,因此被广泛用于结核病的诊断和流行病学调查［1］。但随着卡介苗(BCG)的大规模应用,PPD 的缺陷开始显现。由于共享抗原谱,PPD 不能区分Mtb感染和BCG 接种,因此特异性较差。近年发展起来的新型体外诊断方法——γ 干扰素释放试验(interferon gamma release assay,IGRA),采用Mtb 特异性抗原,解决了PPD 特异性低的问题。早期PPD 皮肤试验用于Mtb 潜伏感染(latent tuberculosis infection,LTBI)调查,并据此估计世界约 1 ／ 3 人口为 LTBI［2］；而目前采用IGRA 筛查的LTBI 数据估计明显低于此比例［3］。但IGRA 对实验技术和条件要求较高,且价格较贵,世界卫生组织并不推荐将IGRA 作为低收入国家和一些中收入国家的Mtb 感染者的筛查手段［4］。我国作为BCG 普遍接种国家,也是结核病高负担国家,LTBI 人数巨大,需要简便、特异和高通量的新型诊断方法［5］。

借鉴传统PPD 的皮试方法,本实验室早期选择Mtb 中存在而BCG 中丢失的east6 基因,研发了第一代Mtb 感染鉴别抗原11kDa［6］；之后通过增加新抗原CFP10,以提高制剂的灵敏度,构建了第二代Mtb感染鉴别抗原重组ESAT6-CFP10 融合蛋白(简称EC)［7-9］。在临床前研究中,本文以BCG 致敏豚鼠和PPD 试剂为对照,平行比较了11kDa 和EC 对Mtb 感染豚鼠的检测效果。……