西方蜜蜂囊状幼虫病病毒云南毒株的多聚蛋白基因扩增及序列分析
2021-06-18曹兰沈克飞王瑞生张邑帆高丽娇张祖芸曹联飞
曹兰,沈克飞,王瑞生,张邑帆,高丽娇,张祖芸,曹联飞
1.重庆市畜牧科学院,重庆402460;2.云南省农业科学院,云南红河 661101;3.浙江省农业科学院,浙江杭州310021
囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)是危害蜜蜂健康的主要病毒之一,在各国普遍流行[1]。SBV感染能造成幼虫死亡或不能成蛹,缩短成蜂寿命,影响蜂群群势[2]。相对于西方蜜蜂(Apis mellifera),包括中华蜜蜂(Apis cerana cerana)在内的东方蜜蜂(A.cerana)对SBV 更易感,感染产生典型症状,所造成的危害更大[3]。SBV 为单股正链昆虫小RNA样病毒(picorna-like virus),现被划入传染性软化病病毒属(Iflavirus)。基因组除去Poly A 尾后约含8 830 个碱基,G / C 含量低(约占 37%),仅有 1 个大的开放阅读框架(open reading franme,ORF),约占基因组长度的97%,编码约2 860 个氨基酸残基的多聚蛋白(polyprotein)。在病毒自身编码蛋白酶的作用下,多聚蛋白氨基端剪切、加工产生成熟的结构蛋白,羧基端剪切、加工产生为非结构蛋白,包括RNA解旋酶、RNA 依赖的 RNA 聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)及蛋白酶。
SBV 主要包含2 大基因型,即亚洲及欧洲基因型(或称东方及西方蜜蜂基因型),分别感染东方及西方蜜蜂[3-5]。分子进化研究发现,一些在亚洲饲养的西方蜜蜂感染的SBV(AmSBV)属亚洲基因型[6-8]。这些属亚洲基因型的AmSBV 中,或是亚洲与西方基因型毒株的重组体,或是与同亚型的东方蜜蜂的SBV(AcSBV)在基因组水平上具有高度相似性[8-10]。人工感染试验证实,AcSBV 能感染西方蜜蜂,在成蜂及幼虫中均能检出AcSBV[11-12]。
目前,GenBank 上公布来自自然感染的中国西方蜜蜂的SBV(AmSBV-Chn)序列仅有1 株全基因组序列(登录号:MG733283),其与AcSBV 有高同源性,属亚洲基因型[13]。另外,GenBank 上还公布了多株SBV 的RdRp 基因序列,建立在RdRp 基因的分子进化分析得出AmSBV-Chn 属亚洲基因型[14]。……
