杨锐，谢青，江华，毛玉娟，王莉，何亚丽，申进增，伊琳

甘肃中医药大学中西医结合学院,甘肃兰州730000

高血压是一种慢性疾病,可导致多种心血管疾病的发生发展,如心力衰竭、血管性痴呆及中风等,这些疾病均与高血压改变动脉壁的结构和功能相关［1］。血管内皮细胞通过释放旁分泌信号分子NO和前列环素来控制血管反应性,从而控制血压［1］。microRNAs(miRs)是一种小的非编码RNA,转录后通过与目标信使RNA(mRNAs)结合来调控基因的表达,从而诱导mRNA 降解或阻断翻译［2］。在前期研究中,发现当归可对自发性高血压大鼠心肌组织miR-122的表达产生影响,可能是通过调控miR-122 靶基因,即阳离子氨基酸转运体1(solutecarrierfamily7member1,Slc7a1)基因的表达来影响内皮功能［3］。

藁本内酯是从中药当归、川芎等伞形科植物中提取的主要活性成分。研究表明,藁本内酯具有舒张血管、抗炎、抗氧化、抑制肿瘤细胞增殖等作用［4］。本研究采用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)建立人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤模型,并检测藁本内酯对损伤HUVECs 中miR-122 表达及精氨酸转运通路miR-122 ／ 阳离子氨基酸转运蛋白-1(cationic amino acid transporter-1,CAT-1)／ NO 的影响。

1 材料与方法

1.1 细胞株 HUVECs 购自上海传秋生物科技有限公司。

1.2 主要试剂 藁本内酯购自兰州化学物理研究所；AngⅡ(批号:1220G031)、缬沙坦(批号:724A021)及NO 检测试剂盒(批号:201812110)购自中国北京索莱宝科技有限公司；ECM 培养基(批号:26327)、青-链霉素(批号:25862)、人内皮细胞生长因子(endothelial cell growth supplement,ECGS)(批号:26130)及胎牛血清(批号:26313)购自美国ScienCell 公司；胰酶(批号:2042337)购自美国Gibco 公司；CCK8 试剂盒(批号:KR675)购自日本同仁公司；兔抗CAT-1单克隆抗体(批号:00616770)、兔抗GAPDH 多克隆抗体(批号:00068668)及荧光标记的山羊抗兔IgG(H + L)(批号:20000003)购自美国 Proteintech 公司；……