罗燕萍，陈永斌，刘启华，黄显雯，李南方，范俊逸，张保德

（广西医科大学第一附属医院，南宁 530021）

中风是全球致死和致残的主要原因之一，其发病率呈逐年升高趋势，给家庭和社会带来沉重的经济负担。目前的治疗原则是短时间内迅速恢复缺血半暗带血流，改善侧支循环，在一定程度上挽救神经元死亡。龙蛭汤（LZD）是在补阳还五汤的基础上加水蛭、牛膝合成，弥补了补阳还五汤益气强而活血之力不足的缺点，起到益气活血并重的作用。该方是广西名老中医陈永斌教授总结自己多年临床经验而自拟的益气活血经验方。前期动物实验研究表明，LZD能在一定程度上改善脑梗死急性期神经功能缺损症状[1]；细胞实验表明，LZD促进血管新生的同时上调自噬水平，并建立侧支循环从而在一定程度上改善神经功能[2]，但其影响神经功能的具体机制尚不清楚。因此，本研究通过建立过氧化氢（H2O2）诱导的神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）氧化损伤模型，进一步探讨LZD含药血清调控自噬促进神经功能恢复的作用机制，为LZD在促进脑梗后神经元恢复的临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 30 只SPF 级雄性SD 大鼠，6 周龄，体重（200±20）g，由广西医科大学实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK（桂）2020-0004。实验动物饲养于广西医科大学实验动物中心SPF 级动物房，室温20～22 ℃，昼夜明暗交替时间12 h/12 h，相对湿度40%～50%，自由饮水和摄食。

1.2 细胞及SH-SY5Y的验证 神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y 购自Procell Life Science＆Technology Co,.Ltd.（武汉，中国），并使用PowerPlex@18D System通过ABI3500 Genetic Analyzer（Life，USA）验证细胞。

1.3 药物制剂 LZD（黄芪120 g、当归6 g、赤芍4.5g、桃仁3 g、红花3 g、川芎3 g、地龙3 g、水蛭3 g、川牛膝6 g）购自广西中医药大学第一附属医院中药房，江阴天江药业有限公司规范炮制，该颗粒剂各项质量检测均达国际标准。……