刘思彤，吴新贵，王斌华，张 游，尹亚龙

（广西医科大学第一附属医院中医科，南宁 530021）

脑梗死是临床常见病，具有很高的神经残疾和死亡负担[1]。大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型是脑梗死常用的动物模型，广泛应用于脑梗死的疾病研究中。电针治疗常用于脑梗死的临床治疗[2-3]，但其具体机制尚未明确。微小核糖核酸（microRNA，miRNA）是一种重要的调节性非编码RNA，是一类长约22 个核苷酸的内源性非编码RNA，在转录后水平调节基因表达。miRNA通过与其靶基因mRNA的结合，导致靶基因mRNA 下调，蛋白翻译抑制，从而调控靶基因表达[4]。一些miRNA 可能参与了电针促进卒中后脑功能恢复的过程，这为电针治疗缺血性脑卒中的机制研究提供了新的方向。因此，本文通过电针干预MCAO 大鼠，获取缺血侧大脑皮层进行转录组miRNA 测序分析，比较分析电针治疗后MCAO 大鼠缺血侧大脑皮层miRNA 表达谱的变化，来探究miRNA在脑梗死疾病发生发展及诊断治疗的作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物 雄性SD 大鼠18 只，体质量250～280 g，SPF级，购自广西医科大学实验动物中心，动物生产许可证号：SCXK 桂2014-0001，动物使用许可证号：SYXK 桂2014-0003。动物饲养条件：温度25 ℃，12 h明暗交替，自由摄食、饮水。

1.2 主要试剂及仪器 Trizol 试剂（Life technologies公司）；氯仿（广州化学试剂厂）；异丙醇（广州化学试剂厂）；乙醇（广州化学试剂厂）；酚:氯仿（25:24）（广州化学试剂厂）；小RNA 建库试剂盒(#E7300)。华佗牌针灸针(苏州医疗用品厂有限公司)；sDz—Ⅱ型华佗牌电子针疗仪(苏州医疗用品厂有限公司)；电泳仪（北京市六一生物科技有限公司）；凝胶成像系统（Tanon）；PCR 仪（ABI Step One Plus Real-Time PCR System，Life Technologies）；Agilent 2100生物分析仪（Agilent Technologies）。……