杨雅雯，李 姿，张 竞，王改丽，兰云刚，李 芳，贺文琦，高 丰，宋德光*

(1.吉林大学 动物医学学院，吉林 长春 130062；2.吉林省畜牧兽医科学研究院，吉林 长春 130062；3.青岛易邦生物工程有限公司 动物基因工程疫苗国家重点实验室，山东 青岛 266144)

猪血凝性脑脊髓炎是由猪血凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus，PHEV)引起的一种猪的传染病，根据临床症状可分为呕吐型、脊髓炎型和流感型。仔猪为PHEV易感群体，死亡率较高，该病在全世界多个国家均有发生和流行，给养猪业造成严重的经济损失，目前尚无特效的治疗药物和疫苗[1-2]。

天然免疫是机体抵抗病毒侵略的第一道防线，干扰素(IFN)是参与天然免疫应答的主要细胞因子，且β-干扰素(IFN-β)在抗病毒免疫中扮演着重要角色。病毒在感染复制过程中产生一种特殊的保守结构，称为病原相关分子模式(PAMPs)，其被模式识别受体(PRRs)识别，经过一系列级联信号分子的激活，最终诱导IFN-β的产生，并被IFN受体识别，发挥其抗病毒的免疫作用[3-5]。

已有研究表明，PHEV感染细胞早期能够抑制树突状细胞分泌IFN-β[6]，而病毒蛋白在此过程中的作用及机制尚不清楚。故本研究利用多个病毒蛋白重组载体进行筛选，证明PHEV核衣壳(N)蛋白能够抑制IFN-β表达，并且N蛋白对IFN-β的拮抗作用是通过与宿主细胞MAVS互作实现的。

1 材料与方法

1.1 细胞、毒株和质粒小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)、人肾上皮细胞(HEK-293T)、重组质粒(pcDNA3.1(-)-MAVS、eGFP-IRF3、myc-IRF3、IFN-β-luc、IRF3-luc、NF-κB-luc)以及PHEV-67N毒株(登录号：AY078417)，均由吉林大学分子病理解剖实验室保存。

1.2 主要试剂LipofectamineTM3000转染试剂购自Invitrogen公司；放线菌酮、多聚次黄嘌呤-胞嘧啶核苷酸(Poly(I∶C))购自InvivoGen公司；……